MMP—2、P53蛋白在大鼠实验性蛛网膜下腔出血后早期脑损伤中的作用研究(2)
1.2 方法 (1)按SABC法进行免疫组化染色,检测MMP-2及P53蛋白在海马CA1区的表达水平。MMP-2表达阳性细胞胞浆着色呈棕黄色,P53阳性细胞为细胞浆和细胞核均染成棕黄色,但胞浆着色较轻。选取海马CA1区相应的区域,每个区域选取5个×400镜下视野,计数阳性细胞个数,取平均值,采用生物医学分析系统进行定量分析,分析各组阳性细胞表达程度的差异。(2)TUNEL染色检测海马CA1区神经细胞凋亡情况,凋亡结果判定:细胞核中有棕黄色颗粒者为TUNEL阳性细胞,即凋亡细胞。阳性反应的细胞定量采用imane-proplus软件系统,每只大鼠取海马CA1区切片观察,取切片中海马CA1区相互不重叠的5个视野,×400倍视野下计数阳性细胞平均个数。结果采用彩色医学图象分析系统和Nikon UFX-IIA荧光/光学显微镜及显微照相机进行海马CA1区阳性细胞记数(个/×400倍视野)。1.3 观察指标 海马CA1区MMP-2及P53蛋白的表达水平,海马CA1区神经细胞凋亡情况。
1.4 统计学处理 使用SPSS 16.0统计软件进行统计学分析,计量资料采用(x±s)表示,数据采用ONE WAY ANOVA对每个时间点上6个分组的数据进行重复测量资料单因素方差分析 ......
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