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编号:13207617
泽泻汤对巨噬细胞泡沫化脂质沉积及其IL—1β表达的影响(2)
http://www.100md.com 2017年12月15日 中国医学创新 2017年第35期
     1.2 制备泽泻汤 据《金匮要略》原方剂量比例配置泽泻汤,由泽泻、白术组成泽泻汤,福建省康复医院药剂科提供药品,以上中药均符合《中华人民共和国药典》2005年版有关规定。制备相当于生药材2.64 g/mL的药液:第一次煎药添加水量与药量的比为6∶1,浸泡1 h后再煎20 min;第二次煎药添加水量与药量的比为4∶1,煎0.5 h后两次药液混合,再浓煎蒸馏,制备完毕后4 ℃冰箱储存备用。

    1.3 SD大鼠腹腔巨噬细胞提取及细胞培养 先向SD大鼠腹腔内注射10 mL RPMI1640培养液,72 h后以颈椎脱臼法处死。然后腹腔内注射RPMI1640培养液10 mL,75%酒精浸泡5 min,严格无菌操作条件收集腹腔内液,1500 r/min离心5 min后收集细胞,用含10%胎牛血清的无酚红RPMI1640培养液调整细胞数至5×106 mL/L,将细胞接种到覆有盖玻片的6孔板和25 cm2培养瓶中,置5% 二氧化碳、37 ℃孵箱培养6 h,经显微镜观察细胞贴壁后弃去上清液,PBS冲洗液洗去未贴壁细胞。

    1.4 泽泻汤含药血清的制备 清洁级雄性SD 大鼠40 只,体重200~210 g。饲养4 d后,清洁级雄性SD大鼠随机分为空白血清组(注射相同量的生理盐水)和泽泻汤含药血清组 ......
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