甘露消毒丹及其挥发油对流感病毒感染小鼠肺部炎症相关因子的影响(3)
1.2.6 血清IL-6、TNF-α表达水平检测 采用双抗体夹心ELISA法,测定小鼠血清中IL-6、TNF-α含量,分别用小鼠IL-6、TNF-α的ELISA试剂盒。检测程序按照试剂盒说明书进行。1.2.7 Western Blot法检测NF-κB蛋白的表达 用总蛋白提取试剂提取总蛋白,离心取上清液。BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度,提取液中加入5×SDS上样缓冲液,100 ℃变性10 min,蛋白上样每孔10 μL,10%SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分离,转膜30 min,2%BSA室温封闭2 h。一抗室温孵育2 h,4 ℃过夜,TBST 10 min/次洗膜(3次),二抗室温孵育1 h,TBST 10 min/次洗膜(3次)。ECL发光,Fluor Chem Q蛋白质印迹成像系统显色。
1.3 统计学处理 所有实验计量数据均以均数±标准差(x±s)表示,用SPSS 20.0统计软件分析,统计方法采用单因素方差分析,组间比较采用LSD检验,以P<0.05表示差异有统计学意义。
2 结果
2.1 各组小鼠肺指数、干湿比及病理评分比较 A组第3、7、10天的肺指数均低于B组 ......
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