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编号:13242294
成年小鼠心脏单个细胞悬液的制备及流式细胞检测(1)
http://www.100md.com 2018年2月5日 《中国医学创新》 2018年第4期
成年小鼠心脏单个细胞悬液的制备及流式细胞检测,流式细胞术,白细胞,树突状细胞
     【摘要】 目的:制備成年小鼠心脏单细胞悬液,测定心肌缺血再灌注损伤(reperfusion injury,RI)小鼠心肌中白细胞的分布情况。方法:选取10~12周龄SPF级雄性C57BL/6小鼠15只,按照随机方法将其分为假手术组5只(模型制备成功5只)和RI 24 h组10只(模型制备成功7只)。RI 24 h组小鼠心脏缺血30 min后,于再灌注24 h后摘取小鼠心脏,配置心脏消化液,冲洗剪碎进行消化,经过滤离心收集心脏细胞,行流式细胞检测,以CD45标记白细胞,并进一步行CD11c标记树突状细胞及Ly6C标记单核细胞。比较两组CD45阳性细胞比例及CD11c、Ly6C标记的细胞占CD45阳性细胞比例;比较两组各细胞在总心肌细胞中的比例。结果:每只小鼠心脏制备所得的单个细胞悬液行细胞计数为(1~2)×106个 ......
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