1.2 方法

    1.2.1 主要试剂 兔抗人CASP7多克隆抗体购买于生工生物工程(上海)股份有限公司。PV-8000-1二步法通用试剂盒(6 mL)，ZLI-9018 DAB显色试剂盒(3 mL)，ZLI-9029抗体稀释液(50 mL)，ZLI-9062 PBS缓冲液粉末(pH 7.3)10袋/包，均购于北京中衫金桥生物技术有限公司。梯度酒精、蒸馏水、二甲苯、中性树胶及苏木精、过氧化物酶阻断剂，免疫动物血清、SP免疫组化试剂盒、生物素标记的第二抗体、PBS枸橼酸抗原修复缓冲液均由佳木斯大学附属第一医院病理科提供。

    1.2.2 免疫组化 利用免疫组化(SP)四步法检测中耳胆脂瘤组织与正常外耳道皮肤组织中Caspase-7与Bak蛋白的表达情况。将一抗兔抗人CASP7多克隆抗体按照1︰200的浓度进行稀释，同时利用PBS枸橼酸抗原修复缓冲液对标本组织进行酸修复，以PBS代替一抗做阴性对照。利用HE染色后用中性树胶封片，显微镜下观察。

    1.3 观察指标与评价标准 所有切片全部采用双盲法进行观察与计数(以病理科两位正高职称医师为准)，避开组织切片的边缘 ......