1.2 方法

    1.2.1 仪器和试剂 研究统一采用由哈尔滨凯普德生物科技有限公司提供的Cobas检测仪器设备及试剂盒。

    1.2.2 标本采集与检测方法 所有研究对象均采用罗氏Cobas HPV检测法与实时荧光定量PCR检测法测定HPV16/18DNA病毒载量。标本采集方法为：采用毛刷插入受检者宫颈管内，围绕子宫颈旋转2周，刮出宫颈口和宫颈管内的上皮细胞。将采集到的所有受试对象的Preserv Cyt或Sure Path标本置于备好的专用试管中，扫描条码并建立相应工作命令文件。操作步骤根据仪器提示进行，按要求将耗材与试剂放置于Cobas x 480提取仪器中，试剂主要有18 mL洗脱液、200 mL洗液、磁珠13.5 mL、9 mL十二烷基硫酸鈉、1.0 mL HPV Mg/Mn、两管1.2 mL的蛋白酶K、两管1.0 mL的HPV MMX、0.5 mL HPV阴性对照、0.5 mL HPV阳性对照。在试剂与耗材准备完毕后即可开始DNA的提取。将提取完成且已自动添加样品和试剂的PCR板转移至Cobas z 480全自动分析仪中开始PCR的扩增处理与荧光检测 ......