沉默Ambra1基因增强大肠癌细胞对5—FU的化疗敏感性(3)
的大肠癌细胞系进行常规消化、计数,并将细胞接种于96孔板中,培养8 h。向每一个孔加入适量的5-FU,使浓度分别为0、0.5、1、2、4、8 μg/mL处理细胞。每一个孔中加入MTS试剂20 μL,继续孵育3 h。开启酶标仪,设定波长为490 nm,检查每一个孔的吸光度。1.8 统计学处理 使用SPSS 16.0软件和Image J软件对所得数据进行统计分析,本研究中各项实验均独立重复3次,采用LSD-t检验。以P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 siRNA-Ambra1抑制HCT15和HCT116细胞中Ambra1的表达分析 HCT15、HCT116细胞转染siRNA-Ambra1-1、siRNA-Ambra1-2后,Ambra1 mRNA的表达水平中siRNA-Ambra1-HCT116-1、siRNA-Ambra1-HCT116-2分别为(3 230.00±982.00)、(1 920.00±719.00) ......
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