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编号:13281542
狼毒大戟多糖对小鼠脾淋巴细胞增殖及细胞因子分泌的影响(2)
http://www.100md.com 2018年8月25日 《中国医学创新》 2018年第24期
     1.2.2 小鼠脾淋巴细胞增殖实验 按1.2.1方法制备的小鼠脾淋巴细胞悬液,按5×105/100 μL/孔加入96孔培养板,将细胞分为五组,空白组用完全培养基常规培养,其余各组分别加入不同质量浓度的狼毒大戟多糖100 μL,使狼毒大戟多糖终质量浓度分别为25、50、100、200 mg/L,各组再加入Con A使其终浓度为5 mg/L,每组设3个复孔。置于37 ℃、含5% CO2的培養箱中培养60 h后,各孔加入5 mg/L的MTT溶液20 μL,继续孵育4 h,终止培养。离心,弃上清,加入150 μL DMSO,振荡溶解结晶,在570 nm波长处测定吸光度(A570 nm)值。

    1.2.3 小鼠脾淋巴细胞IL-2和IFN-γ水平的测定 按1.2.1的方法制备的小鼠脾淋巴细胞悬液,按5×106 mL/孔加入24孔培养板,空白组细胞用完全培养基常规培养,其余各组分别加入不同质量浓度的狼毒大戟多糖,使狼毒大戟多糖终浓度分别为25、50、100、200 mg/L,再加入Con A使其终浓度为5 mg/L ......
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