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编号:13267597
可溶型小鼠细胞因子LIGHT/TNFSF14的原核表达、纯化及活性验证(3)
http://www.100md.com 2018年11月15日 《中国医学创新》 2018年第32期
     2.3 LIGHTc 活性检测 利用凝血酶对结合在亲和纯化树脂上的GST-LIGHTc进行消化(图3A),经凝血酶处理后得到了游离的可溶型LIGHT单体(20 kDa)。用终浓度1 μg/mL的LIGHTc处理CMT93细胞,分别在处理0、24、48 h时测定细胞的相对存活数。本实验中制备的LIGHTc能够明显抑制CMT93增殖,异源表达所制备的可溶型LIGHTc是具有生物学活性的,见图3B和表1。

    3 讨论

    LIGHT属于TNF超家族,在机体各组织器官中均有表达,并在成熟的T细胞和未成熟的树突状细胞中高表达,LIGHT参与多种生物学过程,如伤口愈合、纤维化、骨骼肌再生、干细胞分化等。明确LIGHT发挥作用的机制,对于阐明其所参与的生物学过程将具有重要的推动作用。本实验室前期研究表明LIGHT能够抑制脂肪前体细胞的分化,为进一步阐明其中的机制,对LIGHTc进行了大肠杆菌异源表达纯化 ......
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