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编号:13389448
化疗药物对大鼠卵巢储备功能的影响(2)
http://www.100md.com 2019年3月5日 《中国医学创新》 2019年第7期
     1.2 动物模型制备及分组 SD大鼠饲养于屏障环境内,自由饮水、采食。喂养中的昼夜节律为12 h光照,12 h黑暗。经过一周的适应期后,大鼠随机分为3组:对照组(12只)、顺铂低剂量组(16只)和顺铂高剂量组(12只)。用生理盐水配制终浓度为0.5 mg/mL的顺铂溶液。上述三组动物分别进行腹腔注射生理盐水1 mL、顺铂4.5 mg/kg或顺铂6.0 mg/kg,每周注射一次,共两周。实验过程中,定期检查动物的一般情况并称量体重。

    1.3 标本采集 药物注射结束后,二氧化碳吸入法麻醉并处死动物。进行心脏采血,离心,分离血清并分装,储存于-80 ℃。

    1.4 ELISA检测 用AMH ELISA试剂盒检测大鼠血清中AMH的水平,具体操作按说明书进行,简述如下。取20 μL标准品、对照品和血清样本,加入96孔板中,孵育、洗板。再将生物素标记的抗体加入,孵育、洗板。此后,加入HRP,孵育、洗板。最后,TMB显色,酶标仪测450 nm和620 nm处波长。该方法的检测敏感度为0.017 ng/mL,同一次检测的变异系数为4.6%,不同次检测间的变异系数为8.0%。

    1.5 统计学处理 使用SPSS 11.0统计学软件进行分析 ......
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