增生性瘢痕组织中肿瘤坏死因子αR1 mRNA的表达及意义(2)
1.2 方法1.2.1 仪器、试剂 分光光度仪(型号:Ultrospec3000,美国Pharmacia Biotech),TNF-αR1、β-actin引物由中山大学安达基因股份有限公司合成,PCR基因扩增检测仪(型号:ABI75000,北京欣兴强森生物科技有限公司),TD-2Y多功能离心机(中山市生科试剂仪器有限公司),RT-PCR试剂盒(中山大学达安基因有限公司),TRIzol Reagent总RNA提取试剂盒(美国英杰生命技术有限公司),凝胶成像分析系统(WD0413C型,北京)。
1.2.2 方法 (1)总RNA提取:将正常、增生性瘢痕组织,放入研钵加液氮冷冻,即刻研磨成粉末,研磨期间注意不断加液氮,然后室温放置2~3 min,将研磨组织移入离心管中,加TRIzol充分振荡,并静置5 min以使组织、细胞裂解充分,后行离心处理(12 000 g,10 min)去除沉淀。加氯仿抽提3 min,行高速离心处理(12 000 g,15 min,4 ℃),吸取上清液,加异丙醇沉淀RNA,再行高速离心(12 000 g ......
您现在查看是摘要页,全文长 4238 字符。