54家食源性疾病哨点医院。本研究通过首次收集营口市2015-2017年每年的5-10月共363份急性胃肠炎腹泻患者粪便标本，了解诺如病毒感染的变化趋势，为营口市诺如病毒的预防控制提供科学依据。现报道如下。

    1 资料与方法

    1.1 一般资料 2015-2017年按照营口市食源性疾病诺如病毒监测方案要求，采集54家营口市食源性疾病哨点医院急性胃肠炎腹泻患者的粪便标本。每年5-10月共收集粪便标本363份(10～15 g/份)。

    1.2 试剂与仪器 RNeasy Mini Kit病毒核酸提取试剂盒(美国QIAGEN公司)。全自动核酸提取仪QIACube(美国QIAGEN公司)。诺如病毒GⅠ型/GⅡ型核酸检测试剂盒(荧光PCR法)(JC50103，江苏硕世生物科技有限公司)。QuantStudio 5实时荧光定量PCR仪(美国ABI公司)。

    1.3 方法 (1)病毒的RNA提取：在生物安全柜中挑取黄豆大小的粪便(水样便50～100 μL)置于已标记的1.5 mL EP管中，加入500 μL生理盐水溶解稀释。震荡15 s，10 000 r/min 4 ℃离心5 min。取200 μL上清液用RNeasy Mini Kit(JC50103)提取核酸 ......