土木香内酯增效替莫唑胺抑制胶质瘤干细胞增殖的分子机制(2)
1 材料与方法1.1 细胞株 人胶质瘤细胞系U87MG和U251MG购自ATCC细胞库,由本实验室培养传代冻存。
1.2 实验药品及制备 TMZ购自美国ATCC公司,用DMSO 解稀释成50 mM,冻存在-20 ℃备用。ALT购于上海永叶科技有限公司。DMEM高糖培养基、特级胎牛血清购自艾莱萨生物科技有限公司,Annexin V-PE/7-AAD 凋亡试剂盒购自上海碧云天生物技术有限公司;cleaved-caspase-9、caspase-9、Bcl-2和Bcl-xl购于Cell Signaling Technology。
1.3 主要仪器及设备 二氧化碳培养箱,NUAIRE,美国;电泳槽、电泳仪,BIO-RAD,美国;流式细胞仪,BD,美国。
1.4 细胞培养 U87MG、U251MG细胞培养于含10%胎牛血清、1%青链霉素的DMEM培养基中;在37 ℃,CO2浓度为5%的培养箱中培养。
1.5 MTT法检测细胞生存率 取对数生长期的U87MG、U251MG细胞,吸出细胞培养基 ......
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