CMV IgM抗体检测及IgG抗体亲和力分析对CMV原发性感染的诊断意义(2)
1 资料与方法1.1 一般资料 选取2017年1-12月于本院就诊以及住院的CMV感染的80例患者的临床资料进行回顾性分析。纳入标准:所有患者的临床资料均较为完整;疑似CMV感染并经检测CMV IgG抗体存在血清学转换或CMV IgG、CMV IgM检测结果为阳性;排除标准:患有严重的感染性或者免疫性疾病者;患有精神类疾病或者认知功能障碍不能配合本研究者;中途退出本研究者。所有患者中男43例,女37例,年龄26~65岁,平均(45.1±3.2)岁;所有患者及家属均知情同意并签署知情同意书,本研究已经医院伦理委员会批准。
1.2 方法
1.2.1 标本采集 于清晨抽取所有患者5 mL的空腹静脉血,经10 min离心后取其血清待测。
1.2.2 免疫荧光法检测CMV IgG抗体 利用CMVAD169感染的人胚肺成纤维细胞进行相应的胰酶消化,并将相应的细胞核进行纯化,然后在其中加入1/3正常的HEp-2细胞核,为内参阴性的参照对比;在印制28孔的孔片中将上述细胞悬液放入其中并进行滴涂,待干燥后采用丙酮进行15 min的固定。对血清标本进行稀释后将抗原片滴入其中,之后将其置于37 ℃的环境中进行30 min的孵育,进行PBS冲洗后,加入Evans蓝稀释并带有荧光标记的IgG抗体内,同样在37 ℃的环境中进行孵育30 min,再次进行PBS冲洗,用甘油封片,并放置于显微镜下进行观察 ......
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