1.2.2 促排卵方案和胚胎培养 应用长方案促排卵，取卵后行常规IVF，37 ℃、三气培养箱内培养胚胎，第三天新鲜移植两枚卵裂胚或冷冻两枚卵裂胚，剩余可利用胚胎培养至第5～6天，养成的可利用囊胚行玻璃化冷冻。

    1.2.3 囊胚质量评级及囊胚冷冻和解冻 根据David Gardner提出的囊胚分级系统分级对分级在CC以上的第5天或者第6天囊胚进行玻璃化冷冻。本中心定义2PN来源且3BB级以上囊胚为优质囊胚。在囊胚玻璃化冷冻前，先进行激光皱缩。囊胚冷冻过程：将囊胚在冷冻1液，冷冻稀释培养基[含10%血清蛋白替代物(SPS)的4-羟乙基哌嗪乙磺酸(HEPES)液]中放置10 min，随后转移至冷冻2液[1.5 M苯二胺(PPD)溶液]中2 min，在冷冻3液(1.5 M PPD溶液+0.1 M蔗糖溶液)中转移3个位置并在1 min内装载到加藤载杆的前端上，立刻将载杆叶片浸入液氮中，装好套管，把胚胎保存在液氮中。胚胎解冻过程为：将载杆从液氮中取出，放入解冻1液(0.5 M蔗糖解冻液)2 min中，再移至2液(0.2 M蔗糖解冻液)中3 min，3液[HEPES培养基(含10% SPS)]中10 min，移至G-2微滴皿中清洗最后放于移植皿。

    1.2.4 子宫内膜准备 激素替代周期：月经第3天开始口服6～12 mg/d补佳乐 ......