宋钉町 马博 曹博威 来比江·吾斯曼 张文斌

    胃癌(gastric cancer，GC)是胃肠道一种常见的恶性疾病，相关统计显示，胃癌已成为全球第五大癌症，是继肺癌、结直肠癌和肝癌的第四大死亡原因[1]。在我国，尽管胃癌的发病率和死亡率都在下降，但仍处于世界较高水平，且存在性别和年龄差异，疾病负担集中在高龄人群，而我国的人口老龄化逐渐加重，了解其可能的发病机制，并实施精准性防控策略刻不容缓[2-3]。随着现代分子生物学的不断发展，microRNA(miRNA)在胃癌的早期诊断、疾病干预和预后评价中发挥了越来越重要的作用。miRNA 是单链、高度保守的小分子非编码RNA，含有20～24 个寡核苷酸，以组织特异性的方式表达。miRNA 主要是通过与目标mRNA 3'非编码区的碱基配对进行交互作用，利用mRNA 的降解或翻译抑制，对目标基因的表达进行调控，到现在为止，人们已经发现，多达30%的人类基因的表达都受到它的调控，并对人体生长发育，细胞增殖、凋亡，以及新陈代谢等重要的生理过程产生影响[4-5]。胃癌的增殖与转移是一个多步骤、多阶段、多因素调控的持续而复杂的生物学过程，在此过程中miRNA 发挥着重要的作用[6]，但其机制尚不明确。因此，我们将以人胃癌细胞SGC-7901 为切入点，从细胞和分子两个层面，深入探讨miR-25 在人胃癌细胞SGC-7901 增殖、侵袭、迁移、凋亡等方面的作用及其可能的作用机制，为阐明miR-25在胃癌发生发展中的作用奠定基础。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    人胃癌细胞SGC-7901 购自普诺赛(货号：CL-0206)，采用上海生工生物工程股份有限公司制备的miR-25 及内参U6 引物，使用从杭州朗基科技仪器有限公司采购的荧光PCR 定量分析(型号：Q2000B)，使用Elabscience 公司生产的Annexin V-APC/7-AAD 双染法细胞凋亡检测试剂盒(货号：E-CK-A218)，从合肥白鲨生物科技有限公司购入总RNA 提取试剂(货号：BS259A)，自北京凯奥科技发展有限公司购入酶标仪及超微量分光光度计(型号：K5800)，CCK-8(货号：BA00208)、beta-Actin(货号：bs-0061R)、转化生长因子-β(TGF-β)抗体(货号：bs-0086R)均购于中国Bioss 公司，从Solarbio 公司购入BCA 蛋白浓度测定试剂盒(货号：PC0020)，细胞流式仪(型号：LSRII)购自BD 公司。

    1.2 实验方法 ......