任秋月，胡春燕，旷媛媛

    成都医学院第三附属医院 急诊科，四川 成都 611730

    急性呼吸窘迫综合征是导致呼吸衰竭的主要原因，其病理特征是由于促炎和氧化途径的激活，引发快速而强烈的炎症反应，导致炎性细胞的积累、肺间质水肿和肺泡上皮损伤，随后肺细胞外基质重塑[1]。急性呼吸窘迫综合征的发病率和死亡率均较高，据报道，全球每年有300 多万病例和7.5万死亡病例[2]。以往认为急性呼吸窘迫综合征的发病机制局限于氧化应激、细胞凋亡、炎症、缺氧[3]，最近的研究表明，铁死亡亦参与了急性呼吸窘迫综合征发展，抑制铁死亡可有效缓解病情[4]。铁死亡是一种新的细胞调控死亡形式，其特征是铁依赖的脂质过氧化物的积累，而形态学、生物学明显不同于凋亡、坏死、自噬和其他形式的细胞死亡[5]。铁死亡过程涉及众多信号通路调控，其中沉默信息调节因子1(SIRT1)/核因子E2 相关因子2(Nrf2)信号通路被认为是关键性信号通路之一，激活该通路可减轻脂质过氧化反应，进而抑制铁死亡[6]。漆黄素是一种类黄酮类化合物，常见于植物和各种水果蔬菜中，如烟树、葡萄、苹果、草莓、柿子、黄瓜和洋葱等，具有广泛的药理作用，包括抗炎、抗氧化、抗癌、神经保护等[7]。有研究报道，漆黄素对脂多糖诱导的急性呼吸窘迫综合征有保护作用，能够明显减轻肺损伤[8]。因此，本研究采用气管内滴注脂多糖法建立急性呼吸窘迫综合征模型，观察漆黄素对急性呼吸窘迫综合征大鼠铁死亡的影响，探究SIRT1/Nrf2 信号通路作为其作用机制的可能性。

    1 材料与动物

    1.1 试剂与仪器

    脂多糖(质量分数≥98%，货号A2313，北京康瑞纳生物科技公司)；漆黄素(质量分数>98%，货号T2879，南京赛泓瑞生物科技有限公司)；SIRT1抑制剂(EX-527，质量分数≥98%，货号E7034，Sigma-Aldrich 公司)；白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)ELISA 检测试剂盒(货号EEL-R0015c、E-EL-R2856c，Elabscience 公司)；DHE荧光探针检测试剂盒(货号HR8685-UAR，北京百奥莱博科技有限公司)；铁检测试剂盒(货号ab83366，Abcam 公司)；谷胱甘肽(GSH)检测试剂盒、丙二醛(MDA)检测试剂盒、HE 染色试剂盒、RIPA 裂解液、核蛋白抽提试剂盒、BCA 试剂盒(货号S0052、S0131S、C0105S、P0013B、P0028、P0012S，上海碧云天生物技术有限公司)；兔源一抗anti-β-actin、anti-SIRT1、anti-Nrf2、anti-Histone H3、山羊源二抗(货号ab115777、ab189494、ab92946、ab176842、ab6721 ......