康艳慧，穆萍萍，张海雷

    1.北京大学第一医院太原医院 太原市中心医院 风湿免疫科，山西 太原 030001

    2.北京大学第一医院太原医院 太原市中心医院 病理科，山西 太原 030001

    3.太原市第四人民医院 内科，山西 太原 030053

    类风湿关节炎是一种慢性进行性的自身免疫性关节疾病，具有高发病率和高致残率的特征。类风湿关节炎患者主要病因是成纤维样滑膜(FLSs)细胞异常增殖和炎症因子大量释放，进而破坏患者关节局部结构，最终导致关节畸形和功能障碍[1]。雷公藤是一种临床上用于治疗风湿性关节炎的传统中草药，而雷公藤甲素是从雷公藤中分离鉴定出的一种主要活性成分，目前已有的研究表明，雷公藤具抗类风湿、抗炎症等作用，降低炎症因子白细胞介素(IL)-18 和IL-1β 水平[2-3]。因此，雷公藤甲素治疗类风湿关节炎具有一定疗效，但其具体的作用机制尚不明确。近期，有研究表明雷公藤能够通过抑制LC3B 蛋白表达，增强p62 表达抑制线粒体自噬，同时还减少NLRP3 表达进而缓解结肠炎引发的炎症损伤[4]。NLRP3 的表达和细胞焦亡息息相关，并且在类风湿关节炎滑膜组织中检测到细胞焦亡相关蛋白GSDMD-N 表达显著上调[5]。基于此，本研究通过比较不同质量浓度的雷公藤甲素对类风湿关节炎FLSs 细胞线粒体自噬、NLRP3 炎症小体的活化和细胞焦亡的影响，探讨雷公藤甲素治疗类风湿性关节炎的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 细胞

    FLSs 细胞(货号ZY-R025)和类风湿关节炎FLSs 细胞(货号HZ-H197)购自上海沪震生物科技有限公司。

    1.2 主要试剂与仪器

    雷公藤甲素(质量分数≥98%，货号38748-32-2)购自上海源叶生物科技有限公司；二甲基亚砜(DMSO，货号01934-1L)购自Sigma-Aldrich 公司；青霉素–链霉素溶液(货号SV30010)、DMEM(货号SH30022.01B)培养基购自Hyclone；细胞焦亡检测试剂盒(货号为ab39412)购自Abcam 公司；IL-1β、IL-18 ELISA 检测试剂盒(货号JC-E1109、JCA04206)购自上海机纯实业有限公司。本研究所用抗体微管相关蛋白 1 轻链 3B(LC3B，货号ab192890)、聚集素-1(p62，货号ab109012)、抑制素2(PHB2 ......