李一田， 王 璐， 崔瑞琴，2

    (1.宁夏医科大学中医学院，银川 750004； 2.生育力保持教育部重点实验室，银川 750004)

    雷公藤多苷(tripterygium wilfordii glycosides，GTW)是从雷公藤根芯部提取的一种脂溶性混合物，具有抗炎、免疫抑制、抗肿瘤等功效。自1987年首次报道[1]GTW 可用于治疗儿童过敏性紫癜性肾炎(henoch-schonlein purpura nephritis，HSPN)，经过30 多年的临床实践证实，GTW 具有确切的降低蛋白尿和血尿、消除水肿的作用[2-5]。但是，GTW 也引起一些严重不良反应的临床个案，其中生殖系统的不良反应更是引起广泛关注。因此，研究GTW 的损伤机制对临床安全用药具有重要意义。枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharides，LBP)是中药枸杞的重要有效成分之一。LBP 具有抗氧化、抗衰老、免疫调节、抗肿瘤、调节血糖、降血脂、抗辐射、神经保护、生殖系统保护等多种生物功效[6]。本课题组前期的实验结果已经证明，LBP 可通过上调大鼠睾丸组织中Bcl-2的表达来发挥促进GTW 所致生殖损伤的修复作用[7]，而Bcl-2 是核因子-kB(nuclear factor-kappab，NF-kB)信号通路下游的重要靶点之一，具有抑制细胞凋亡的作用。因此，本实验是在前期研究基础上，基于NF-kB 信号通路进一步探索LBP 拮抗GTW 生殖损伤的机制。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物

    雄性SD 大鼠30 只，3 周龄，体质量(60±10)g，SPF 级，购买自宁夏医科大学实验动物中心(许可证号：SCXK(宁)2015-0001)。SPF 级动物房饲养，温度(25±1)℃，湿度(50±10)%，自由进食、饮水。常规环境适应性饲养7 d 后开始实验。

    1.2 主要实验试剂和药品

    雷公藤多苷片(GTW，规格10 mg/粒，100 粒/瓶，江苏美通制药有限公司，批号：Z32021007)；LBP(95%浓度，宁夏宏德生物技术有限公司)；羧甲基纤维素钠(CMC-Na，天津市凯通化学试剂有限公司)；兔抗鼠p-p65、p65、Bcl-2、IKBα、βactin 及辣根过氧化物酶(HRP)标记的山羊抗兔二抗(北京博奥森公司)；全蛋白提取试剂盒、BCA蛋白含量检测试剂盒及SDS-PAGE凝胶配制试剂盒(江苏凯基生物技术股份有限公司) ......