张丹阳， 王宇欣， 李一田， 王 璐， 崔瑞琴，2

    (1.宁夏医科大学中医学院，银川 750004； 2.生育力保持教育部重点实验室，银川 750004)

    雷公藤多苷(tripterygium wilfordii glycosides，GTW)是从植物雷公藤的根、茎中提取的总苷，具有肯定的降尿蛋白功效，曾经是儿童紫癜性肾炎的常规治疗药物，治疗效果较好，如钟娇霞等[1]临床研究发现:雷公藤多苷联合丙种球蛋白治疗儿童过敏性紫癜性肾炎效果优于单纯注射丙种球蛋白。然而近年来因其毒副作用被限制临床应用，如GTW 产生的生殖副作用令众多患儿家长担忧——导致患儿成年后的不孕或不育，所以目前诸多学者着眼于减少GTW 毒副作用的机制研究。为减轻GTW 的生殖毒副作用，更好地发挥其疗效，因此本研究在前期GTW 生殖损伤机制研究基础上探讨GTW 对睾丸支持细胞(Sertoli Cell，SC)增殖的影响，以期为GTW 安全用药提供理论依据。

    1 材料与方法

    1.1 实验动物与细胞来源

    SD 雄性大鼠36 只，SPF 级，体质量180～220 g，购于宁夏医科大学实验动物中心，饲养于SPF 级动物房饲养。小鼠SC 获赠于生育力保持教育部重点实验室。

    1.2 实验材料

    雷公藤多苷片(江苏美通制药有限公司，批号:180102)；补肾益精丸(厦门中药厂，批号:171001)；羧甲基纤维素钠、DEME 培养基、青链霉素、胎牛血清(GIBCO 公司)；胰蛋白酶(索莱宝科技有限公司)；MTT 细胞增殖与细胞毒性试剂盒、细胞周期检测试剂盒、全蛋白提取试剂盒、BCA 蛋白含量检测试剂盒(凯基生物技术股份有限公司)；Caspase-9 兔一抗、Caspase-3 兔一抗(Bioss 公司)；山羊抗兔二抗(Abbkine 公司)；Western Blot ECL(advansta 公司)。

    1.3 细胞与含药血清共培养实验方法

    1.3.1 制备含药血清 将适应喂养后的SD 大鼠按体质量随机分为无药血清组、GTW 组、补肾中药组，每组12 只，均灌胃，1 次/d，连续7 d。无药血清组予0.5%羧甲基纤维素钠溶液，GTW 组予雷公藤多苷混悬液0.9 mg/0.5 mL(将GTW 生药磨碎溶于0.5%羧甲基纤维素钠溶液中) ......