田雪敏，石璐璐，董 辉，杨彩虹

    (1.宁夏医科大学临床医学院，银川 750004；2.宁夏医科大学总医院医学科学研究院，银川 750004；3.宁夏医科大学总医院心脑血管病医院妇科，银川 750004)

    子宫内膜癌(endometrial cancer，EC)是一种由持续的雌激素暴露、代谢异常、未育、遗传基因易感性等原因引起的女性生殖系统恶性肿瘤。目前，EC 发病率逐年增高，在中国女性生殖系统恶性肿瘤中居第二位，在发达国家排名第一[1]。研究[2]发现，有多种miRNAs 可参与EC 的诊断、治疗、预后等过程，为EC 的研究提供了新方向。miR-34 家族已被发现在多种癌症中表达异常，因其可以被肿瘤抑制基因p53 直接调控，故其被认为可以抑制肿瘤的发生[3]。miR-34b-5p 是miR-34家族成员之一，研究[4]表明，miR-34b-5p 可在多种癌症中表达，且抑制肿瘤的增殖、迁移、侵袭等生物学行为。Grb2 相关结合蛋白1(Grb2-associated binder 1，Gab1)是细胞的骨架蛋白，参与细胞形态的维持。Gab1 也可以作为信号通路中的“放大器”，通过激活通路促进肿瘤细胞的生长并抑制其凋亡[5]。miR-34b-5p 在子宫内膜样腺癌(endometrioid adenocarcinoma，EEC)淋巴结转移患者中显著下调，而在雌激素影响下，Gab1 在子宫内膜中的表达水平随月经周期发生改变[6-7]，推测miR-34b-5p、Gab1 可能与EC 的发生、发展有关，但关于二者与EC 的关系尚未见报道。通过Targetscan(http://www.targetscan.org/vert_72/)和miRDB(http://mirdb.org/)生物学预测网站发现，Gab1 是miR-34b-5p 的调控靶点。Gab1 基因是哺乳动物雷帕霉素靶点(mammalian target of rapamycin，mTOR)通路的上游分子，可以传递磷酸化基团至mTOR 通路，以引起mTOR 通路的激活，促进肿瘤的增殖和侵袭。鉴于此，本研究主要探究miR-34b-5p 调控Gab1 的表达，介导mTOR通路在EC 细胞——人子宫内膜腺癌细胞(human endometrial adenocarcinoma cells)AN3CA 中的作用机制。

    1 材料与方法

    1.1 主要试剂和仪器

    人子宫内膜腺癌细胞AN3CA(上海名劲生物科技有限公司)；DMEM 培养基(上海源培生物科技股份有限公司)；Certified Fetal Bovine Serum(FBS ......