王 芳，韩彩玲，任丽芸，陈 华

    (1.宁夏回族自治区人民医院妇产科，银川 750004；2.宁夏医科大学总医院妇科，银川 750004；3.宁夏银川市第二人民医院妇产科，银川 750021)

    子宫内膜异位症(endometriosis，EMs)是一种严重影响女性身心健康的慢性激素依赖性疾病，并可发生周期性盆腔疼痛、性交疼痛及不孕等[1]。50%～90%的EMs 青春期女性有痛经或慢性盆腔疼痛，但目前控制EMs 妇女盆腔疼痛仍是一项挑战[2]。目前，关于EMs 的疼痛发病机制仍有争议，药物治疗主要包括雌孕激素相关药物。EMs患者神经纤维的异常分布、神经生长因子(nerve growth factor，NGF)的异常表达与其疼痛密切相关[3]。有研究[4-6]显示，NGF 除了作为重要的神经营养因子外，还可以诱导丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)/环腺苷酸应答元件结合蛋白(CREB)表达增加，增加机体对膝骨关节炎伤害性刺激的敏感性，参与疼痛的发生，但其在EMs 中的具体作用机制尚不清楚。因此，本研究借助雌激素及其抑制剂氟维司群药物干预EMs 在位内膜间质细胞，检测上述因子表达变化，探讨其在EMs 疼痛发病机制中的作用。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    选取2019年3月至2020年10月就诊于宁夏医科大学总医院因卵巢子宫内膜异位囊肿行手术治疗的患者9 例，分离培养子宫内膜间质细胞作为EMs 组；收集同期因其他卵巢良性肿瘤行手术治疗的患者9 例，分离培养子宫内膜间质细胞作为对照组。该研究已获得宁夏医科大学总医院伦理委员会批准(KYLL-2021-736)。

    1.2 主要试剂

    兔抗NGF 多克隆抗体(ab62557)、兔抗CREB多克隆抗体(ab52628)、β-actin 抗体(ab8227)、山羊抗兔HRP 二抗(ab6721)均购自英国Abcam 公司；兔抗MAPK 多克隆抗体(sc-377400)购自美国Santa Cruz Biotechnology 公司；17-β 雌二醇及氟维司群购自美国MCE 公司；SYBRRPremix Ex Taq(RR820A)、PrimeScriptTMRT reagent Kit with gDNA Eraser(RR047A)均购自日本Takara 公司；BCA蛋白提取检测试剂盒购自凯基公司；波形蛋白、角形蛋白均购自英国Abcam 公司 ......