石璐璐， 田雪敏， 董 辉， 杨彩虹

    (1.宁夏医科大学临床医学院，银川 750004； 2.宁夏医科大学总医院医学科学研究院，银川 750004；3.宁夏医科大学总医院心脑血管病医院，银川 750004)

    子宫内膜癌是女性最常见的妇科恶性肿瘤之一[1]，其发病率和病死率呈上升趋势，且容易复发和转移[2-3]，对女性的健康和生命构成了极大的威胁。以往研究[4]表明，子宫内膜癌好发于围绝经期和绝经后女性，随着生活水平的提高，肥胖、雌激素水平紊乱、糖尿病及高血压等危险因素促使其发病趋于年轻化[1，5]。因此，探讨子宫内膜癌的致癌基因和发病机制对于子宫内膜癌的预防和治疗尤为重要。

    miRNAs 是一类长度为19～25 个核苷酸的单链非编码RNA 分子，通过与靶基因的3’非翻译区结合来调控基因的表达，其异常表达与多种肿瘤的发病机制密切相关。miR-34a-5p 作为miR-34 家族中的一员，具有与p53 通路相关的肿瘤抑制功能[6]。相关研究[7-9]发现，miR-34a-5p 在结直肠癌、乳腺癌和卵巢癌中低表达，这表明miR-34a-5p 的表达失调是肿瘤发生的关键因素之一。上皮间充质转化(EMT)是上皮细胞转化为间充质细胞的过程，也是促进肿瘤细胞迁移和侵袭的重要机制。研究[10]表明，肿瘤细胞通过miRNAs来参与EMT 过程从而调控相关的癌症转移，如miR-451 抑制胶质瘤细胞的侵袭、迁移和EMT过程。但miR-34a-5p 在子宫内膜癌的相关研究较少，故本研究旨在探讨miR-34a-5p 对子宫内膜癌AN3CA 细胞侵袭、迁移和EMT 过程的影响，从而为子宫内膜癌的预防、诊断和治疗提供新的方向。

    1 材料与方法

    1.1 材料

    1.1.1 细胞来源 人子宫内膜癌AN3CA 细胞由宁夏医科大学总医院科研设备管理中心提供。

    1.1.2 主要试剂 miR-34a-5p 过表达慢病毒及其空载体慢病毒购自汉恒生物科技(上海)有限公司，SYBR Green PCR 试剂盒购自天根生化科技(北京)有限公司，引物miR-34a-5p 购自生工生物技术(上海)有限公司，引物U6 购自广州锐博生物科技有限公司，高糖DMEM 培养基购自上海源培生物科技股份有限公司，胎牛血清购自以色列Biological Industries 公司 ......