刘道伟， 张 娜， 刘琭璐， 章 梅， 杨惠芳

    (1.宁夏医科大学公共卫生学院，银川 750004； 2.宁夏环境因素与慢性病控制重点实验室，银川 750004)

    尘肺病是在职业活动中长期吸入不同致病性的生产性粉尘，并在肺内潴留而引起的，以肺组织弥漫性纤维化为主的一组职业性肺部疾病的统称[1]。目前，尘肺病是我国发病人数最多、危害最严重的职业病，包括矽肺和煤工尘肺[2]。虽然近几年我国尘肺病的新发病例数呈下降趋势，但尘肺病给我国职业人群造成的危害仍然不可忽视[3]。在尘肺发病机制的复杂炎性网络中，线粒体的致病作用越来越受到大家的重视。线粒体是细胞内氧化磷酸化的场所，为细胞生命活动提供能量、生成ATP 的同时，生成副产物活性氧，还具有调节细胞凋亡、内容物致炎等多种作用[4]。因此，粉尘引起的肺组织线粒体功能障碍可能是尘肺纤维化的重要发病机制之一。本研究拟在建立大鼠尘肺纤维化模型的前提下，利用转录组测序技术筛选出尘肺病发生和发展过程中与线粒体有关的重要基因，并进行生物信息学分析，以期为后续研究尘肺病的分子机制提供参考依据。

    1 材料与仪器

    1.1 实验动物

    无特定病原体(SPF)级7～8 周龄雄性SD 大鼠30 只，体质量200～220 g，购自宁夏医科大学实验动物中心。实验动物饲养于(25±2)℃，空气湿度50%～60%，12 h 明暗交替环境中，自由饮水、摄食，统一进食标准，适应性饲养1 周后开始进行实验。所有动物实验均符合动物伦理委员会标准。

    1.2 材料和试剂

    煤尘(宁夏煤矿矿井内回风巷降尘)；二氧化硅标准品(美国Sigma-Aldrich 公司)；乙醚(东莞市化学试剂有限公司)；4%多聚甲醛(兰杰科技有限公司)；苏木素(北京索莱宝科技有限公司)；伊红(北京索莱宝科技有限公司)；Wiegert 铁苏木素(上海双简生物科技有限公司)；丽春红酸性品红(上海士锋生物科技有限公司)；磷钼酸[阿拉丁试剂(上海)有限公司]；苯胺蓝(南京化学试剂股份有限公司)；辣根过氧化物酶标记链霉菌抗生物素蛋白溶液(杭州纽龙生物科技有限公司)；DAB 染色液(北京索莱宝科技有限公司)。

    1.3 主要仪器

    石蜡切片机、低温高速离心机(德国Rjung Heidelberg 公司)；洁净工作台(力康生物医疗科技控股有限公司)；精密电子天平(宁波金诺天平仪器有限公司) ......