【摘要】附睾上皮细胞培养和永生化方法的确立，对研究生殖系统疾病以及附睾特异表达基因的功能具有重要意义。本文对附睾上皮细胞体外培养模式做简要综述。

    【关键词】附睾上皮细胞；原代培养方法；永生化

    附睾是哺乳动物精子成熟发育和储存的场所，它通过自分泌/旁分泌激素、酶、特异营养成分等一系列复杂的生化和形态变化使精子成熟、泳动、获得受精能力。附睾在发生病原感染和炎症后会严重危害男性生殖健康。现在人们已经认识到上皮细胞不再是一个单纯的物理屏障，而是一个具有多重身份的宿主防御参与者[1,2]，其在附睾炎的发病过程中具有重要的调节作用[3]，可以识别病原生物的入侵并启动细胞内的信号通路，合成细胞因子和化学因子等物质协同杀死入侵病原生物以保护附睾免受感染[3~6]。目前附睾上皮细胞免疫防御的细胞信号通路以及如何启动感染引起的炎症反应等机制尚不清楚[7]。因此，建立体外培养模式，即原代附睾上皮细胞培养和永生化附睾上皮细胞的建立，不仅能够促进对体内生化过程的了解，而且为明确附睾上皮细胞在生殖和附睾炎症反应中的作用机制以及研究附睾特异性基因表达的机理奠定基础。

    1附睾上皮细胞原代培养方法

    目前用于原代附睾上皮细胞培养的方法主要有两种。一种是Castellon等[8]提出的。无菌条件取出附睾，放置于含有青霉素(50 IU/ml)、链霉素(50 μg/ml)的F12/DMEM(1:1)中，剔除脂肪。将组织块放在含有0.35%胰酶、0.2%透明质酸酶、0.1% BSA和0.01% DNase的培养液中 ......