LAMP法和PCR法对阪崎肠杆菌快速检测的对比探究
 |
| 第1页 |
参见附件。
【摘要】 目的：研究LAMP法和PCR法在阪崎肠杆菌快速检测中的差异，指导临床在阪崎肠杆菌快速检测中方法的选择。方法：针对阪崎肠杆菌的OmpA基因，设计相关特异性引物，分别建立LAMP法和PCR法两种检测方法体系对其进行检测，并对两种检测方法的灵敏度进行记录比较；分别采用两种方法对45株阪崎肠杆菌近源菌进行检测，分析比较两种方法的特异性；最后采用两种方法对60份商场奶粉样品进行检测，将检测结果与FDA检测结果进行比较分析。结果：两种检测方法的灵敏度检测结果显示：LAMP法对阪崎肠杆菌快速检测的敏感度(101 cfu/ml)明显高于PCR法(102 cfu/ml)，两者比较差异有统计学意义(P<0.05)；在对45株阪崎肠杆菌近源菌的检测中，显示LAMP法有5株阪崎肠杆菌出现阳性结果，而PCR法则显示非特异性条带，表明LAMP法检测的特异性明显优于PCR法。结论：LAMP法对阪崎肠杆菌快速检测有效可行、灵敏度高、特异性强，是临床进行阪崎肠杆菌快速检测的一种有效方法。
【关键词】 LAMP； PCR； 阪崎肠杆菌
中图分类号 R33 文献标识码 A 文章编号 1674-6805(2013)5-0001-02
阪崎肠杆菌是肠杆菌科的一种，是奶粉(乳)制品中新发现的一种致病菌。由其可引发婴儿各种疾病，致病机制可能与其侵入、诱导凋亡及肠毒素作用有关[1]。对于阪崎肠杆菌的检测，最新研究发现LAMP法对阪崎肠杆菌快速检测，灵敏度高、特异性强[2]。笔者所在医院应用LAMP法和PCR法对阪崎肠杆菌快速检测的进行对比探究，现报道如下。
1 资料与方法
1.1 菌株标本
所研究的菌株共60株，其中2株阪崎肠杆菌标准菌株是由广东省微生物研究所提供的ATCC51329和ATCC29544，8株阪崎肠杆菌野生菌株是采用FDA传统手段从商场奶粉或果汁中提取出来的；其余在试验中用到的菌株均为本实验室自己保存。
1.2 仪器
细菌基因组DNA抽提试剂盒(上海生工生物工程技术服务有限公司)，Bst DNA Polymerase(美国NEB公司)，betaine(美国Sigma公司)，agarose(Promega) ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件。