孕妇血型不规则抗体检测对预防新生儿溶血病HDN的临床意义(2)
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1.2 HDN纳入标准
(1)分娩后72 h内出现黄疸,且黄疸快速加重,且2周内黄疸不见消退[3]。(2)黄疸出现后1~4 d行血清胆红素检测,早产儿超出256.5 μmol/L、足月儿超出220.6 μmol/L[4]。(3)排除因药物原因或其他因素引起的溶血。(4)受试孕妇产前检查及分娩均于笔者所在医院妇产科完成,有完整的病例档案。(5)受试孕妇知情。
1.3 试剂与仪器
Kubota公司提供的KA 2200型离心机,上海精科实业有限公司提供的XW 80A型漩涡混合器。上海血液生物医药有限公司提供的标准红细胞、广谱抗人球蛋白、抗A/B抗体等。
1.4 方法
1.4.1 血清制备 受试孕妇及配偶取静脉自凝血4 ml,于室温下孵育60 min后于离心机分离血清。
1.4.2 红细胞制备与酶处理 受试孕妇及配偶取静脉抗凝血2 ml,以生理盐水冲洗3次后分别配置成浓度5%的红细胞悬液。取2 ml木瓜凝乳蛋白酶溶液、2 ml抑制剂、孕妇血细胞悬液和配偶血细胞悬液各1 ml于室温下孵育10 min,加入1 ml酶液,室温下处理5 min,加入抑制剂终止反应。处理后产物以生理盐水冲洗3次,制备成浓度5%的经酶处理后的红细胞悬液。
1.4.3 血型检测 ABO血型采用纸板法和试管法定型检测;Rh血型采用纸板法定型检测。
1.4.4 不规则抗体检测 采用凝聚胺法检测。
1.4.5 抗A/B IgG效价测定 以酶法测定。
1.5 观察指标
观察和比较两组新生儿HDN发生率、黄疸出现时间及总胆红素浓度检测结果。
1.6 统计学处理
采用SPSS 18 ......
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