ZnPcS2P2介导的光动力疗法诱导HL—60细胞凋亡的分子机制(2)
1.4 DNA倍体分析检测ZnPcS2P2-PDT对HL-60细胞细胞周期的影响细胞用PBS洗涤后,用Kenesis 50试剂(Bio-Rad)染色,置流式细胞仪(美国BD公司)检测,应用Cell modifit软件分析细胞周期。
1.5 ZnPcS2P2-PDT对HL-60细胞bcl-2、c-myc、hTERT与Fas等基因mRNA表达的影响
应用TRIZOl(Life Technology)提取各组细胞总RNA,所提取的RNA OD260 : OD280>1.8,经电泳可见明亮清晰的18 s与28 s
两条rRNA带,说明RNA完整。cDNA合成及扩增体系参见文献[5]。所用试剂均来自Promega公司产品。以β-actin为内参照,PCR产物经琼脂糖凝胶电泳,凝胶图像分析仪(Gel Doc 1000型,Bio-Rad)分析,比较各组扩增产物荧光强度 ......
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