1.4 ELIS檢测IL-10、IL-1β、TNF-α、IL-6的表达量

    I/R 24 h后快速处死大鼠，在冰盘上分离右侧脑组织，取右侧大脑中动脉供血区域脑组织，距额叶前端3 mm和9 mm处进行冠状切割，取中间6 mm厚的脑组织块，再沿此脑块矢状缝左侧旁开2 mm处，由上至下切下，右侧部分即为右侧MAC供血区。将脑组织与适量PBS混匀，用组织均浆器将脑组织研磨匀浆，组织匀浆于3000 r/min离心20 min，取上清液至新的EP管中，根据说明书制作标准曲线，设空白孔和待测样本孔，然后每孔各加入40 μl的样品稀释液，待测样品孔加入10 μl待测样品，封板膜封板，37 ℃温箱恒温孵育30 min，洗液清洗5次，每次30 s，然后除空白孔外各孔均加入酶标试剂50 μl，37 ℃温箱恒温孵育30 min，洗液清洗5次，每次30 s。显色：每孔加入显色剂A和 B各50 μl，震荡混匀，37 ℃恒温避光显色15 min。终止：每孔各加入终止液50 μl终止反应(此时蓝色立转黄色) ......