1.2.5 建立SKOV3-Rap1-RNAi稳定转染细胞株 将对数生长期的SKOV3细胞取出来，细胞满意度达70%～80%后转染，同时将多个单克隆细胞筛选制备出来，在此过程中将G418充分利用起来，进一步扩大培养，将Rap1具有最显著沉默效果的稳定转染细胞株筛选出来前将总蛋白提取出来，在此过程中将免疫印迹筛选出来[5]。

    1.2.6 MTT试验 将200 μl细胞悬液取出来，有2000个细胞存在于每孔，向96孔板中对细胞进行接种，每组5个复孔，同时将空白孔设立出来调零，共将7个培养板接种出来，在孵箱中放置进行常规培养。接种细胞，一周内每天取1个96孔板，加入20μl的5mg/ml 噻唑蓝(MTT)溶液，在细胞培养箱中继续放置进行4 h的孵育，将培养终止，将孔内细胞培养上清液小心吸弃，在此过程中将1 ml注射器充分利用起来。将150 μl二甲亚砜(DMSO)再加入到每孔中，进行10 min的振荡 ......