乙肝病毒基因分型与原发性肝癌关系研究(2)
1 资料与方法1.1 一般资料
收集2015年1月1日-12月31日,于复旦大学附属中山医院完善血清乙型肝炎病毒五项检测的患者,纳入标准根据文献[4]中华医学会肝病科和传染病科的“慢性乙型肝炎防治指南”的修订,诊断标准分类。排除标准:其他肝脏相关病毒(甲型、丙型、丁型、戊型肝炎)的重叠感染;由脂肪、酒精、药物、自身免疫等其他因素引起的各类肝脏损伤;合并原发性肝癌除外的其他恶性肿瘤病史。共有371例患者符合条件入组,按照是否合并肝癌分为肝癌组(182例)与非肝癌组(189例),通过留取血清来完善乙型肝炎病毒基因分型及相关耐药性检测。
1.2 仪器与试剂
测定乙型肝炎病毒基因分型及相关耐药性检测仪器分别为Roche Light Cycler480荧光定量PCR仪,Roche公司生产;ABI3130基因测序仪,美国应用生物系统公司(ABI)生产。试剂盒是由上海申友生物技术有限责任公司提供(产品货号:YZB/国0080-2009)。
1.3 方法
通过PCR扩增技术结合荧光探针杂交技术对乙型肝炎病毒DNA进行检测,并根据其产物通过测序分析来达到完成基因分型及耐药突变点的检测。
1.4 统计学处理
采用SPSS 20.0对肝癌组及非肝癌组所测的基因各分型及耐药性结果进行分析 ......
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