5.2 第二代测序

    第二代测序也叫高通量测序，其技术平台包括三个，分别是：ABI公司的Solid测序平台、罗氏公司454测序平台、lllumina公司的Solexa测序平台。三个测序平台都有各自的优点，Solid测序平台测序较准确，最大准确度可达99.94%;454测序平台的测序读长较长，可达400 bp;Solexa测序平台性价比较高，运行成本低。第二代测序技术由于其通量大、可定量、成本低、边合成边测序的优点，其研究及应用越来越广泛。二代测序技术已广泛应用于无创产前诊断(NIPT)及有创产前诊断领域[14-16]。在器官移植配型、肿瘤分子诊断和靶向治疗及在药物个体化治疗等方面的应用也成为热点[17]。二代测序技术应用于全外显子组测序、全基因组测序、基因组重测序、从头测序、全转录组测序、小分子RNA测序等方面。其中应用最多的是全外显子测序，下面笔者着重叙述全外显子测序技术。

    于2009年在二代测序基础上开发了全外显子测序(WES)。WES是一种有选择性地捕获和排列所有带注释的蛋白质编码基因编码区域的技术。人类外显子组序列仅占人类整个基因组序列的1% ......