Akt通路在滋养细胞增殖中的调控机制分析(2)
1 材料與方法1.1 一般材料
选择人细胞外滋养细胞,使用无血清培养基培养细胞。主要仪器:美国BD公司生产的流式细胞仪,英国UVP公司生产的成像分析系统。
1.2 研究方法
首先进行细胞培养:将细胞接种于培养瓶中,使用新生牛血清的培养基进行培养。细胞融合后用胰蛋白酶消化,洗涤后进行传代。细胞接种于96孔板,使用无血清培养基进行培养。采用四甲基偶氮唑蓝MMT显示转染后细胞的增殖情况,干预组1、2无血清培养基中分别加入表皮生长因子50、100 ng/ml作用24 h(干预组1、干预组2)。对照组不加表皮生长因子。检测各组吸光光度值。流式细胞技术检测滋养细胞凋亡情况,将LY294002加入三组中作用24 h,观察每个培养基中的凋亡及增殖情况[4]。
1.3 统计学处理
本研究数据采用SPSS 20.0统计学软件进行分析和处理,计量资料以(x±s)表示 ......
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