绝经后骨质疏松症患者外周血T淋巴细胞亚群检测及临床意义(2)
1.2 方法采用流式细胞仪检测两组外周血T淋巴细胞亚群:(1)制備单细胞悬液,将1X10-7的细胞放入1.5 ml离心管中3 000 r/min离心5 min,弃上清液,然后加入FACS缓冲液100 μl悬浮细胞;(2)封闭表面Fc受体,在步骤(1)得到的液体中加入Fc受体抗体0.5 μl(0.5 mg/ml),水浴3 min;(3)细胞与荧光抗体结合,在步骤(2)得到的液体中加入荧光抗体1 μl(0.5 mg/ml),水浴30 min;(4)洗细胞去除游离的荧光抗体,在步骤(3)中加入FACS缓冲液350 μl,轻轻摇晃混匀,放置3 000 r/min的离心机离心5 min,弃上清液,重复步骤此操作2次;(5)上样前处理,取100 μl仪器缓冲液加入细胞沉淀中,轻轻混匀悬浮细胞,将细胞悬液移入FACS专用管中,准备进行仪器检测和分析[6]。
1.3 观察指标
比较两组T淋巴细胞、Ts、Th、Th/Ts、CD16+CD56+、B淋巴细胞水平。
1.4 统计学处理
本研究数据采用SPSS 19.0统计学软件进行分析和处理,计量资料以(x±s)表示,采用t检验,计数资料以率(%)表示,采用字2检验,P<0.05为差异有统计学意义。
2 结果
2.1 两组外周血T淋巴细胞、Ts、Th比较
OP组T淋巴细胞、Ts、Th均低于对照组 ......
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