雷公藤多苷对大鼠肾移植后慢性排斥反应的影响*
调节性,环磷酰胺,1材料,2方法,3结果,4讨论
杨俊伟,杨帅平,王长安,吴秋杰郑州市第七人民医院,河南 郑州 450000
肾移植是挽救终末期肾病患者生命的最佳方式。随着器官保存技术、配型技术的进步、新型免疫抑制剂的应用,肾移植效果得以显著改善,但肾移植患者长期存活率并未显著提高[1-2]。研究证实,慢性排斥反应是导致肾移植失败的主要原因,也是降低肾移植患者长期存活率的关键[3-4]。故探寻抑制肾移植后慢性排斥反应的有效方式,对改善肾移植患者远期预后至关重要。雷公藤多苷是从中药卫矛科雷公藤属植物提取的、临床上广泛应用的非甾体类免疫抑制剂或抗炎药物[5-6]。近年来有学者将雷公藤多苷应用于肾移植术后,可显著降低急性排斥及慢性肾移植肾病发生率[7]。肾移植后细胞免疫、局部免疫将发生变化,T细胞亚群是反映机体免疫状态的重要指标,也是肾移植后关键性效应细胞[8-10],目前其变化规律尚不明确。鉴于此,本研究通过建立肾移植后慢性排斥反应大鼠模型,观察雷公藤多苷对大鼠肾移植后慢性排斥反应的抑制作用,并探讨其对CD4+CD25+调节性T细胞/Th17亚群分化的影响。
1 材料
1.1 动物SPF级雄性近交系F344大鼠45只及Lewis大鼠55只作为供体与受体,12~16周龄,体质量(275±25)g,购自北京维泰瑞技术服务发展有限公司,动物许可证号:SCXK(京)2019-0013。温度(24±1)℃、相对湿度(55±5)%、12 h/12 h明暗交替环境中。本研究经郑州市第七人民医院伦理委员会审核通过,伦理批号:20191015028。
1.2 药物与试剂雷公藤多苷片(贵州汉方药业有限公司,批号:20180369);环磷酰胺片(吉林通化茂祥制药有限公司,批号:20180673);戊巴比妥钠(上海紫一试剂厂,批号:57-33-0);环孢素A(辰欣药业股份有限公司,批号:20173117);40 ng·L-1多聚甲醛溶液(南京化学试剂股份有限公司,货号:50-00-0);尿素氮(blood urea nitrogen,BUN)、肌酐(serum creatinine,Scr)试剂盒(上海江莱生物科技有限公司,货号:1534668026、1535528451);白细胞介素-2(interleukin-2,IL-2)、IL-17 ELISA试剂盒(北京索莱宝科技有限公司,货号:SEKR-0003、SEKR-0007);IL-23 ELISA试剂盒(上海极威生物科技有限公司;货号:GV-E13936);CD4单克隆抗体、CD25单克隆抗体、IL-17单克隆抗体、转化生长因子(transforming growth factor-β1 ......
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