乔炜超，田甜，夏青，张妞

    承德市第三医院，河北 承德 067000

    胰腺癌是目前临床上预后极差的肿瘤之一，具有发病隐匿、分化差和高转移率等特征[1]。目前，临床上治疗该病以根治性手术切除为主，术后辅助化疗，但患者术后5年生存率仍不足20%[2]。据报道，约30%患者在术后1年内胰腺癌复发转移，30%患者在术后2年内发生肿瘤复发转移[3]，因此，研究胰腺肿瘤细胞迁移和侵袭的机制十分必要，同时也需要在化疗基础上探索新的治疗方案提高患者5年生存率。临床上胰腺癌常见化疗方案为吉西他滨+替吉奥，这种治疗方式在治疗疾病的同时也给患者免疫功能、消化系统等带来副作用，出现白细胞降低、呕吐、脱发、药物性发热、口腔溃疡等[4]。承德市第三医院拟制的益气活血解毒方可帮助患者减轻化疗后不良反应，提高患者免疫功能，但其是否能够抑制胰腺肿瘤细胞转移尚不清楚。基于此，本研究通过培养人胰腺癌细胞株及种植胰腺肿瘤的裸鼠观察益气活血解毒方对胰腺肿瘤细胞迁移和侵袭的作用。

    1 材料

    1.1 细胞与动物人胰腺癌细胞系PANC-1(美国菌种保藏中心，目录号：HTB-52)。4周龄左右健康清洁级雌性裸鼠25只，体质量(18±2.5)g，由江苏省动物实验中心提供，生产许可证号：SCXK(苏)2018-0019，实验动物饲养设施使用许可证号：SYXK(苏)2017-0003。所有裸鼠于层流架内分笼饲养，专人负责管理。实验室定期消毒，环境温度20～25 ℃，相对湿度50%～70%。饲养1周后开始实验。本研究经承德市第三医院实验动物伦理委员会批准(伦理批号：20201056)，符合中国伦理委员会有关动物研究指导原则。

    1.2 药物与试剂Trizol试剂、Transwell小室、即用型PBS粉剂、荧光定量siRNA转染试剂盒(美国Thermo Fisher Scientific公司，货号：15596018、140644、12500096、AM1631)；细胞裂解液(美国Sigma-Aldrich公司，货号：R0278)；丝氨酸/苏氨酸激酶 30(serine/threonine kinase 30，STK30)兔多克隆抗体(美国Abcam公司，货号：ab17464)；成纤维激活蛋白β(fibroblast activating protein β，FAB-β)兔多克隆抗体(上海碧云天生物技术有限公司，货号：AZ050)；DMEM高糖培养基(上海微科生物技术有限公司，货号：P04-03510)；胎牛血清(美国BIOIND公司，货号：04-002-1A)；MagCellect Mouse CD4+CD25+Regulatory T Cell试剂盒(美国R&D公司 ......