解脲支原体在宫颈糜烂中的检测及其意义
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宫颈糜烂是妇女常见的疾病之一，其病因复杂，多为葡萄球菌、链球菌、大肠埃希菌和厌氧菌感染所致[1]，目前解脲支原体(UU )感染率不断增加，UU感染与宫颈糜烂的相关性也引起关注。本资料用荧光定量PCR方法对300例患宫颈糜烂的妇女宫颈分泌物进行检测，以探讨UU感染在宫颈糜烂发病机制中的作用。
1 材料与方法
1.1 研究对象：2009 年3月～2009 年12月在我院妇科门诊就诊的300例患宫颈糜烂的妇女。根据糜烂的面积将患者分为3组[1]，轻度组：糜烂面积小于整个宫颈面积的1/3；中度组：糜烂面积占整个宫颈面积的1/3～2/3；重度组：糜烂面积占整个宫颈面积的2/3以上。
1.2 方法
1.2.1 标本采集：月经干净后2～7天，窥阴器暴露宫颈后，用消毒无菌棉球擦拭宫颈表面，无菌棉签伸入宫颈口内2.0cm处，缓慢顺时针旋转2～3周取出，置于含2～3ml生理盐水的试管中，洗脱细胞及分泌物，-20℃冰箱保存待检。
1.2.2 试剂和仪器：荧光定量PCR试剂盒由美国罗氏诊断生产，采用美国ABI Prism 7300 Real Time PCR扩增仪进行检测。
1.2.3 实验方法：按试剂盒说明书操作，将洗脱细胞及分泌物的生理盐水，充分振荡，吸取液体转至1.5ml离心管中，3000 rpm 离心10分钟。吸取多于液体，在沉淀中加入50ul DNA 提取液充分混匀，100度干预10 分钟，常温下静置，120000 rpm 5分钟，上清备用。再行PCR扩增，循环条件为：93度 45秒，55度 60秒，10个循环；93度 30秒，55度45秒，30个循环。最后分析结果并记录数据。
1.3 统计学方法：本资料采用SPSS10.0软件，分类资料采用t检验，P<0.05有统计学意义。
2 结果
300例宫颈糜烂的妇女中，98位妇女的阴道分泌物可以检测到解脲支原体，感染率为32.6%。按宫颈糜烂的面积分组，轻度组，有120名妇女，其中30名妇女的阴道分泌物可以检测到解脲支原体，感染率为25%；中度组，有109名妇女，其中25名妇女的阴道分泌物可以检测到解脲支原体，感染率为23%；重度组：有71名妇女，其中43名妇女的阴道分泌物可以检测到解脲支原体，感染率为61%。三组患者中，重度宫颈糜烂组解脲支原体感染率最高，显著高于其他两组患者的感染率(P<0.05)。
3 讨论
3.1 荧光定量PCR方法检测UU的优越性：UU是女性泌尿生殖道正常菌群之一，属于条件致病菌。在机体抵抗力低下或者粘膜受损的情况下可以成为致病菌，引起非淋菌性宫颈炎，还与女性不孕[2]、早产[3]、自然流产等密切相关。传统的检测UU的方法主要为培养法和血清检测，但培养法检测时，UU分离困难，对培养基要求高，培养时间也较长。流行病学资料显示，仅10%UU感染者UU特异性抗体滴度升高，因此使血清学方法检测UU受限[4]。本资料采用荧光定量PCR检测UU, 结果发现32.6%的宫颈糜烂妇女分泌物中可以检测到UU, 可见荧光定量PCR融合了PCR技术的高敏感性、DNA杂交技术的高特异性，能够快速、准确的检测感染者阴道分泌物中的UU病原体。更为重要的是，荧光定量PCR特别灵敏，文献报道其灵敏度可达10copies，其漏诊率低，因此，采用荧光定量PCR法能简单、快速、准确的检测UU，应广泛应用于临床。
3.2 UU与宫颈糜烂的相关性：本资料发现约32.6%的宫颈糜烂患者阴道分泌物可以检测到UU，且重度宫颈糜烂组UU感染率最高，显著高于其他两组患者的感染率，提示UU可能与宫颈糜烂发病机制及其严重程度有关。推测UU引起宫颈糜烂的机制是UU可以产生磷脂酶 A、C，促进游离的花生四烯酸释放，从而产生前列腺素，而前列腺素可使血管扩张，毛细血管通透性增加，造成组织水肿、腺体分泌增加，引起宫颈炎症[5-7]。
文献报道，无尿道炎及宫颈糜烂的正常妇女中，UU阳性率也可以达到60%[4]。本资料在32.6%宫颈糜烂患者阴道分泌物可以检测到UU，且重度宫颈糜烂组UU感染率最高，推测UU是女性泌尿生殖道正常菌群之一，属于条件致病菌，提示UU导致宫颈糜烂还与机体的免疫状况相关[5-9]，机体免疫力越低，UU感染时间延长，宫颈糜烂的程度也越严重。
宫颈糜烂伴UU感染时，患者通常无自觉症状或者症状轻微，易被忽视，随着病程的延长，宫颈糜烂也越严重，因此UU在宫颈糜烂发生中的作用不容忽视，对可疑患者应进行UU筛查，以达到早期治疗的目的。
参考文献
[1]乐杰.妇产科学[M].第6版.北京：人民卫生出版社，2005：185
[2]张兰英，王成瑜.不孕症妇女解脲支原体、沙眼衣原体感染的临床分析[J].中国计划生育学杂志,2002,12(12):744-745
[3]陈艳,张萍,姚娟.子宫颈支原体感染与早产的关系[J].中国优生与遗传杂志 ，2008，16(4):62–63
[4]Ren Y,Zhu X.Investigation on biovars and genotypes of ureaplasma uralyticum in the cervix in a Chinese gynecologic check - up population and sex workers[J] ......
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