DAPK在人卵巢癌细胞株的表达以及去甲基化后的影响(1)
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摘要:目的:研究死亡相关蛋白激酶(DAPK)在人卵巢癌细胞株OVCAR-3中的表达,并通过去甲基化药物5-氮-2’-脱氧胞苷(5-aza-CdR)的干预,研究DAPK甲基化状态以及表达水平的改变,探讨卵巢癌可能的发病机理,为临床探索卵巢癌治疗的新途径提供实验和理论基础。 方法:(1)采用逆转录PCR(RT-PCR)技术检测用药前后DAPK mRNA在人卵巢癌细胞株OVCAR-3中的表达水平。 (2)采用甲基化特异性PCR(MSP)方法观察用药前后DAPK基因甲基化状态的改变。 结果:(1)未经5-aza-CdR处理的OVCAR-3细胞中DAPK mRNA不表达,经5×10-8mol/L 5-aza-CdR作用后DAPK mRNA表达量为0.098±0.017,并随浓度增加逐渐增强(P<0.01),浓度为10-5mol/L时DAPK mRNA表达量为0.471±0.023。(2)未经5-aza-CdR处理的OVCAR-3细胞完全甲基化;经5×10-8mol/L 5-aza-CdR处理后,甲基化的DAPK基因部分去甲基化;经10-5mol/L 5-aza-CdR处理后,甲基化的DAPK基因完全去甲基化。 结论:甲基化是DAPK表达失活的重要原因。5-aza-CdR通过不同程度逆转启动子区甲基化而恢复DAPK表达与基因转录。
关键词:卵巢肿瘤;死亡相关蛋白激酶;甲基化
卵巢癌是女性生殖道常见的肿瘤之一 ......
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