霍乱弧菌分子分型技术研究进展(2)
2. MLSTMIST在监测全球的流行病上具有强大的优势,数据重复性好,可在互联网上共享。基本步骤:选定目的基因组的数个看家基因位点,扩增各目的看家基因片段,扩增产物纯化后测定各位点片段的DNA序列,给各基因位点指定相应的等位基因数值,根据菌株每个管家基因位点指定相应的等位基因数值,根据菌株每个管家基因的序列信息分配等位基因序号(allele number),把该菌株所有管家基因的等位基因序号合并在一起组成1个等位基因谱(Allelic profile),并给这个等位基因谱分配1个唯一的编号作为该分离株的序列型(sequence types, STs)。屠丽红[7]用多位点序列分析(MLST)方法对霍乱弧菌的七个管家基因(cat, dnaE, lap, rstR, recA, gyrB, chi)进行扩增、测序、比较,对霍乱弧菌的七个管家基因编号,并根据管家基因的不同组合对霍乱弧菌进行ST分型(sequence typing),用BioNumerics软件分析。MLST分型显示不同年代的霍乱弧菌产毒株亲缘关系相近,菌群结构比较集中,非产毒株基因组差异大。
3. PAPD
RAPD技术由美国科学家Wiliams和Welsh[8]于1990年分别提出 ......
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