HPV58型E67融合基因腺病毒载体构建(2)
将HPV58mE67经PCR扩增后连入穿梭质粒pshuttle2,重组pshuttLe2质粒以内切酶PI-SceI和 I-Ceu I进行双酶切,将所得目的片段连入腺病毒载体,以所构建的重组腺病毒载体为模板,用腺病毒引物PF/PR(试剂盒自带)均扩增出287bp条带(图4)。提示携带目的基因的重组腺病毒载体构建成功。进一步Western Blotting分析结果(图5)提示,转染细胞中相应亚型的E6,E7蛋白均有表达。结果中出现多条带(估算为27、35、43KD左右),有文献报导[1] “E7电泳条带与其计算分子量大小可能不符”(E6计算分子量17KD ......
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