超薄液基细胞学检测在肺癌早期诊断中的应用
摘要：目的：探讨超薄液基细胞学检测在肺癌早期诊断及组织分型中的应用价值。方法：收集2011年4月-2013年6月在顺义区医院行纤维支气管镜刷检标本185例，进行超薄液基细胞学检测和传统涂片检查，比较二者在敏感性、特异性方面的差异。结果：185例患者中104名患者最终确诊为肺癌，超薄液基细胞学检测敏感性为56.7%，特异性为97.5%；传统涂片法的敏感性为20.2%，特异性为95.1%，经配对卡方检验二者在敏感性方面差异具有统计学意义(P<0.05)，特异性方面差异无统计学意义；85例肺癌患者接受了液基细胞学及病理组织学的病理分型，二者的总体符合率75.1%。结论：纤维支气管镜刷检结合超薄液基细胞学检测能够提高肺癌的早期诊断机率，其在敏感性方面优于传统涂片。
关键词：液基细胞学检测；肺癌；纤维支气管镜
我国肺癌的发病率和病死率逐年增高，每年新发肺癌患者约70万人，但其中2/3的患者已失去手术机会[1]。因此肺癌的早期诊断至关重要，纤维支气管镜刷片检查是诊断肺癌的重要手段，但由于传统涂片的局限其诊断阳性率不高，我院应用纤维支气管镜刷片结合超薄液基细胞学检测(ThinPrep cytology test， TCT)的方法用于肺癌的早期诊断，取得了良好的效果，现报道如下。
一、资料与方法
1、一般资料：收集2011年4月-2013年6月在顺义区医院行纤维支气管镜刷检标本185例，其中男性102例，女性83例；年龄在41-72岁，平均61.4岁。
2、观察方法：采用Olympus P20型纤维支气管镜，在直视下刷取病灶或可疑处支气管镜粘膜上皮细胞，每例分别制作传统涂片2张，将毛刷直接涂片，并置于95%乙醇总固定10分钟；TCT一张，将毛刷置于TCT保护液中，刷动10次使之充分混合，1500r/min离心，经过新柏氏细胞仪2000程序化处理，制成直径2cm的薄层细胞涂片。二者均行HE染色，每例标本均由两名经验丰富的病理医师共同光镜下阅片观察。
3、临床诊断标准：104例确诊为肺癌的病例，其中85例经手术或活检获得的组织病理学诊断，19例患者无组织病理学结果，根据临床、影像学资料及随访结果得出最终诊断。
4、统计学方法：采用SPSS16.0软件对取得的数据进行统计学分析，采用配对卡方检验的方法，P<0.05为差异具有统计学意义。
二、结果
185例患者中104例最终确诊为肺癌，81例为良性病变。104例肺癌患者中TCT检测敏感性为56.7%，敏感性为20.2%，经配对卡方检验，差异具有统计学意义(P<0.05)。81例良性病变中TCT检测特异性为97.5%，传统涂片检测特异性为95.1%，二者差异无统计学意义(表1)，TCT在敏感性方面优于传统涂片法。85例肺癌患者接受了液基细胞学及病理组织学的病理分型，二者的总体符合率75.3%(表2)
表1 TCT与传统涂片法细胞学检测结果
表2 液基细胞学诊断与组织病理学诊断结果
三、讨论
目前肺癌已成为人类肿瘤死亡的主要原因之一，在我国，肺癌是第一大癌症，且发病率及死亡率呈现逐年增长的趋势。研究表明[2]肺癌的预后与诊断时的临床分期密切相关，Ⅰ期肺癌患者术后的5年生存率可达60%以上，而Ⅳ期肺癌的5年生存率则下降到10%以下。因此，争取“早期发现、早期诊断、早期治疗”，是降低肺癌死亡率的重要措施。
纤维支气管镜镜刷片检查作为肺癌早期诊断的重要手段目前广泛应用于临床，但是由于在传统涂片的种种缺陷，其诊断的敏感性较差。Logrono等[3]通过对支气管镜下细胞学与活检结果的对照研究，分析了支气管镜刷检涂片敏感性较低的原因，认为大多数假阴性的病例源于取材技术的限制，由于细胞学制片技术的缺陷造成的假阴性占24%，而这部分假阴性可以通过改进制片技术得到有效的控制。
超薄液基细胞学检测于1996年获得美国食品与药品管理局(FDA)认证，目前广泛应用于妇科宫颈脱落细胞学诊断。国内冯建荣 [4]通过对妇科液基细胞学检测研究宫颈肿瘤发现，液基细胞学检测具有固定及时、细胞保存好的优点，同时TCT可以去除粘液、血液及炎性渗出物，背景干净，细胞分布均匀，有利于阳性细胞的检出，降低假阴性的机率。笔者同意冯建荣的观点，本研究中传统涂片厚薄不均，背景模糊，镜下肿瘤细胞不易辨别，同时制作过程中可引起的细胞过度干燥，造成一些假象。而经TCT保存液中的细胞经仪器程序化处理，细胞保存较好，细胞结构更加清晰，便于观察和诊断，同时为后期行分子学诊断提供前提条件，大大降低了漏诊率。
在临床上一项检测手段的敏感性是衡量该方法优劣的重要指标，我们经TCT技术应用于支气管镜下刷片检查，结果显示TCT的敏感性明显高于传统涂片的方法。Sheehan等[5]报道，应用肺泡灌洗液结合TCT的方法用于肺癌的诊断，敏感性为53.4%本研究中传统涂片检测敏感度为23.6%，TCT检测敏感度为57.3%，二者差异具有统计学意义。在敏感性方面与Sheehan等取得了研究结果相近。
肿瘤的组织分型是影响治疗及预后的一项重要指标，对于肺癌而言，由于小细胞肺癌，进展迅速，对化疗敏感的特点，临床工作中如何区分小细胞与非小细胞肺癌至关重要，波兰学者[6]通过支气管镜检查细胞学诊断的166例小细胞肺癌进行分析，发现其中77%仅靠细胞学即可诊断。本研究中应用TCT的方法进行细胞学分型，与组织标本组织分型比较，小细胞肺癌分型符合率为79.1%，总体符合率75.3%。
总之，纤维支气管镜刷检结合超薄液基细胞学检测技术在肺癌细胞学诊断中具有较高的敏感性，同时对于组织分型提供了一定参考，但由于细胞学本身存在的缺点，工作中应结合临床及影像学表现，以做出更多准确的诊断。
参考文献：
[1] Grosu HB， Eapen GA， Jimenez CA， et al.Lung cancer screening： making the transition from research to clinical practice.Curr Opin Pulm Med， 2012，18(4)：295-303.
[2] Logrono R，Kurtycz DF，Molina CP et al.Analysis of falsenegative diagnoses on endoscopic brush cytology of billiary and pancreatic duct stricutures：the esperience at 2 university hospitals.Arch Path Lab Med，2000，124(3)：387-392.
[3] 冯建荣. HPV联合TCT检测在宫颈癌病变筛查中的应用.浙江临床医学，2013，08(56)： 1214-1215.
[4] Domaga？a-Kulawik J， Górnicka B， Krenke R，et al. The value of cytological diagnosis of small cell lung carcinoma.Pneumonol Alergol Pol， 2010，78(3)：203-210. (王晓宇)
关键词：液基细胞学检测；肺癌；纤维支气管镜
我国肺癌的发病率和病死率逐年增高，每年新发肺癌患者约70万人，但其中2/3的患者已失去手术机会[1]。因此肺癌的早期诊断至关重要，纤维支气管镜刷片检查是诊断肺癌的重要手段，但由于传统涂片的局限其诊断阳性率不高，我院应用纤维支气管镜刷片结合超薄液基细胞学检测(ThinPrep cytology test， TCT)的方法用于肺癌的早期诊断，取得了良好的效果，现报道如下。
一、资料与方法
1、一般资料：收集2011年4月-2013年6月在顺义区医院行纤维支气管镜刷检标本185例，其中男性102例，女性83例；年龄在41-72岁，平均61.4岁。
2、观察方法：采用Olympus P20型纤维支气管镜，在直视下刷取病灶或可疑处支气管镜粘膜上皮细胞，每例分别制作传统涂片2张，将毛刷直接涂片，并置于95%乙醇总固定10分钟；TCT一张，将毛刷置于TCT保护液中，刷动10次使之充分混合，1500r/min离心，经过新柏氏细胞仪2000程序化处理，制成直径2cm的薄层细胞涂片。二者均行HE染色，每例标本均由两名经验丰富的病理医师共同光镜下阅片观察。
3、临床诊断标准：104例确诊为肺癌的病例，其中85例经手术或活检获得的组织病理学诊断，19例患者无组织病理学结果，根据临床、影像学资料及随访结果得出最终诊断。
4、统计学方法：采用SPSS16.0软件对取得的数据进行统计学分析，采用配对卡方检验的方法，P<0.05为差异具有统计学意义。
二、结果
185例患者中104例最终确诊为肺癌，81例为良性病变。104例肺癌患者中TCT检测敏感性为56.7%，敏感性为20.2%，经配对卡方检验，差异具有统计学意义(P<0.05)。81例良性病变中TCT检测特异性为97.5%，传统涂片检测特异性为95.1%，二者差异无统计学意义(表1)，TCT在敏感性方面优于传统涂片法。85例肺癌患者接受了液基细胞学及病理组织学的病理分型，二者的总体符合率75.3%(表2)
表1 TCT与传统涂片法细胞学检测结果
表2 液基细胞学诊断与组织病理学诊断结果
三、讨论
目前肺癌已成为人类肿瘤死亡的主要原因之一，在我国，肺癌是第一大癌症，且发病率及死亡率呈现逐年增长的趋势。研究表明[2]肺癌的预后与诊断时的临床分期密切相关，Ⅰ期肺癌患者术后的5年生存率可达60%以上，而Ⅳ期肺癌的5年生存率则下降到10%以下。因此，争取“早期发现、早期诊断、早期治疗”，是降低肺癌死亡率的重要措施。
纤维支气管镜镜刷片检查作为肺癌早期诊断的重要手段目前广泛应用于临床，但是由于在传统涂片的种种缺陷，其诊断的敏感性较差。Logrono等[3]通过对支气管镜下细胞学与活检结果的对照研究，分析了支气管镜刷检涂片敏感性较低的原因，认为大多数假阴性的病例源于取材技术的限制，由于细胞学制片技术的缺陷造成的假阴性占24%，而这部分假阴性可以通过改进制片技术得到有效的控制。
超薄液基细胞学检测于1996年获得美国食品与药品管理局(FDA)认证，目前广泛应用于妇科宫颈脱落细胞学诊断。国内冯建荣 [4]通过对妇科液基细胞学检测研究宫颈肿瘤发现，液基细胞学检测具有固定及时、细胞保存好的优点，同时TCT可以去除粘液、血液及炎性渗出物，背景干净，细胞分布均匀，有利于阳性细胞的检出，降低假阴性的机率。笔者同意冯建荣的观点，本研究中传统涂片厚薄不均，背景模糊，镜下肿瘤细胞不易辨别，同时制作过程中可引起的细胞过度干燥，造成一些假象。而经TCT保存液中的细胞经仪器程序化处理，细胞保存较好，细胞结构更加清晰，便于观察和诊断，同时为后期行分子学诊断提供前提条件，大大降低了漏诊率。
在临床上一项检测手段的敏感性是衡量该方法优劣的重要指标，我们经TCT技术应用于支气管镜下刷片检查，结果显示TCT的敏感性明显高于传统涂片的方法。Sheehan等[5]报道，应用肺泡灌洗液结合TCT的方法用于肺癌的诊断，敏感性为53.4%本研究中传统涂片检测敏感度为23.6%，TCT检测敏感度为57.3%，二者差异具有统计学意义。在敏感性方面与Sheehan等取得了研究结果相近。
肿瘤的组织分型是影响治疗及预后的一项重要指标，对于肺癌而言，由于小细胞肺癌，进展迅速，对化疗敏感的特点，临床工作中如何区分小细胞与非小细胞肺癌至关重要，波兰学者[6]通过支气管镜检查细胞学诊断的166例小细胞肺癌进行分析，发现其中77%仅靠细胞学即可诊断。本研究中应用TCT的方法进行细胞学分型，与组织标本组织分型比较，小细胞肺癌分型符合率为79.1%，总体符合率75.3%。
总之，纤维支气管镜刷检结合超薄液基细胞学检测技术在肺癌细胞学诊断中具有较高的敏感性，同时对于组织分型提供了一定参考，但由于细胞学本身存在的缺点，工作中应结合临床及影像学表现，以做出更多准确的诊断。
参考文献：
[1] Grosu HB， Eapen GA， Jimenez CA， et al.Lung cancer screening： making the transition from research to clinical practice.Curr Opin Pulm Med， 2012，18(4)：295-303.
[2] Logrono R，Kurtycz DF，Molina CP et al.Analysis of falsenegative diagnoses on endoscopic brush cytology of billiary and pancreatic duct stricutures：the esperience at 2 university hospitals.Arch Path Lab Med，2000，124(3)：387-392.
[3] 冯建荣. HPV联合TCT检测在宫颈癌病变筛查中的应用.浙江临床医学，2013，08(56)： 1214-1215.
[4] Domaga？a-Kulawik J， Górnicka B， Krenke R，et al. The value of cytological diagnosis of small cell lung carcinoma.Pneumonol Alergol Pol， 2010，78(3)：203-210. (王晓宇)