木瓜提取物体内、体外抗炎镇痛作用的实验研究(2)
1.4.5细胞培养RAW264.7细胞(小鼠单核/巨噬细胞系),在37℃、体积分数为5% CO2条件下,用含体积分数为10%新生牛血清、青霉素(100u/ml)、链霉素(100u/ml)的DMEM培养液传代培养。
1.4.6一氧化氮(NO)测定将对数生长期的RAW264.7细胞接种于24孔培养板中,约3×105/孔,设正常组、脂多糖(LPS) 5ug/ml(模型组)、0.2ug/ml、2 ug/ml、5 ug/ml木瓜提取物低、中、高剂量组。细胞培养贴壁后,各组加入相应药物,药物加入30min后各组再加入终浓度为5ug/ml的LPS,继续培养12h;收集培养液,按NO测试盒要求测定各组NO的吸光度值(OD),并算出NO含量。
1.4.7一氧化氮合成酶(NOS)测定将对数生长期的RAW264.7细胞接种于24孔培养板中,约1×105/孔,设正常组、脂多糖(LPS) 5ug/ml(模型组)、0.2ug/ml、2 ug/ml、5 ug/ml木瓜提取物低、中、高剂量组。细胞培养贴壁后,各组加入相应药物,药物加入30min后再加入终浓度为5ug/ml的LPS,继续培养12h;收集培养液,按一氧化氮合成酶(NOS)测试盒要求测各组NO吸光度值(OD),并算出NOS酶活力。
1.5统计学处理实验数据采用SPSS13.0进行统计分析,组间多项数据比较采用单因素方差分析,数据以(x±s)表示,P<0.05作为显著性差异 ......
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