胃力胶囊定性定量方法研究
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【摘要】 目的：建立胃力胶囊的定性定量方法。方法：采用TLC法鉴别制剂中的半夏、木香、大黄、枳实；采用HPLC法测定龙胆中的龙胆苦苷含量，色谱柱为kromasil C18(5μ250×4.6mm)，流动相为甲醇-水(30：70)，流速1.0 mL·min-1，检测波长274 nm。结果：定性鉴别薄层色谱特征明显,能对半夏、木香、大黄、枳实进行专属定性分析；龙胆苦苷浓度在4.175～41.75ug/ml 范围内线性良好，(r=0.9999),平均回收率为99.38%，RSD=0.37%(n=6)。结论：所建立的方法可以准确的进行定性和定量检测，重复性好，可有效地控制胃力胶囊的质量。
【关键词】 胃力胶囊；薄层色谱；高效液相；质量标准
胃力胶囊由半夏(姜制)、龙胆、 木香、大黄、枳实(制)5味药组成，用于行气止痛,和胃利胆,消积导滞,通腑降浊。用于饮食不节,痰浊中阻,痞满呕吐,胃脘胁肋疼痛,食欲不振,大便秘结；急性胃炎、胆囊炎属上述症候者。为了提高药品质量，笔者在部颁标准收载的“胃力片”质量标准的基础上，制定了胃力胶囊的质量标准，增加了半夏、木香、大黄、枳实的薄层色谱鉴别，并以高效液相法测定了龙胆中的龙胆苦苷进行了定量分析研究，并对含量测定方法进行了方法学验证。建立了可靠，准确，专属性强的质量控制方法，为该制剂建立质量标准提供了依据。
1仪器、试药和供试样品
高效液相色谱仪 Agilent 1100泵 ，DAD 检验器 ，Agilent化学工作站
色谱柱 Kromasil C18 5μ 250×4.6mm
电子天平 BP211B德国Sartorius公司
超声波清洗器 JL-DT60型
甲醇 色谱纯，上海医药公司
超纯水 MilliQ超纯水，过0.2μm微孔滤膜
其他化学试剂均为分析纯
枳实对照品(批号：120936-200404)、唐古特大黄对照品(批号：120902-200408)、木香对照品(批号：120921-200405)、龙胆苦苷对照品(110770-200409)，均购于中国药品生物制品检定所，供含量测定用。
半夏由河南省药品检验所提供。胃力胶囊，自制
2薄层鉴别
2.1半夏
取1g半夏粉末, 加甲醇10ml加热回流30分钟过滤，滤液浓缩，作为供试药材溶液。分别取半夏对照药材1g、本品内容物1g,同法分别制成对照药材溶液和供试品溶液。另按工艺处方制备缺半夏的阴性对照样品，同法制备阴性供试品溶液。分别吸取以上四种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-乙酸乙酯(10:2)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以磷钼酸溶液。供试品溶液和药材溶液在与对照药材色谱相应位置上显相同颜色的斑点，且阴性对照液在相应位置上不干扰。
2.2木香
取0.5g木香药材粉末，加氯仿10ml，超声处理30min，过滤，滤液浓缩，作为供试药材溶液。另取木香对照药材0.5g、本品内容物0.5g 同法分别制成对照药材溶液和供试品溶液。另按工艺处方制备缺木香的阴性对照样品，同法制备阴性供试品溶液。分别吸取以上四种溶液各5μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-环己烷(5:1)(另加甲醇、甲酸数滴)为展开剂，展开，取出，晾干。喷以磷钼酸溶液。供试品溶液和药材溶液在与对照药材色谱相应位置上有相同颜色的斑点，且阴性对照液在相应位置上不干扰。
2.3大黄
取0.1g大黄粉末，加甲醇20ml，浸泡60min，过滤，取滤液5ml蒸干，残渣加水溶解，再加盐酸，加热回流30 min，冷却，用乙醚振摇提取，蒸干，残渣加氯仿溶解，作为供试药材溶液。另取唐古特大黄对照药材0.1g、本品内容物0.1g同法分别制成对照药材溶液和供试品溶液。另按工艺处方制备缺大黄的阴性对照样品，同法制备阴性供试品溶液。分别吸取以上四种溶液各4μl，分别点于同一硅胶G254薄层板上，以石油醚(60-90℃)-乙酸乙酯-水(15:5:1)上层为展开剂，展开，取出，晾干。在紫外灯(365nm)下检视有橙色荧光斑点，氨熏后显红色斑点，供试品溶液色和药材溶液在与对照药材色谱相应位置上有相同颜色的斑点，且阴性对照液在相应位置上不干扰。
2.4枳实
取0.5g枳实药材粉末，加甲醇10ml，超声处理20min，过滤，滤液蒸干，残渣加甲醇，作为供试药材溶液。另取枳实对照药材0.5g、本品内容物0.5g 同法分别制成对照药材溶液和供试品溶液。另按工艺处方制备缺枳实的阴性对照样品，同法制备阴性供试品溶液。吸取上述四种溶液各6 u l，分别点于同一硅胶G254薄层板上，以乙酸乙酯-氯仿(3：8)为展开剂，展开，取出，晾干，紫外光灯(365nm)下检视。供试品溶液和药材溶液在与对照药材色谱相应位置上有相同颜色的斑点，且阴性对照液在相应位置上不干扰。
3含量测定
3.1色谱条件
色谱柱：kromasil ODS C18柱(5μ，250×4.6mm)；流动相：甲醇-水(30：70)；流速：1.0mL?min-1;检测波长为274nm；进样量 10μL。
3.2 试液溶液的制备
3.2.1对照品溶液的制备精密称取龙胆苦苷对照品适量，加甲醇溶解并稀释制成每1ml中含龙胆苦苷10ug的对照品溶液，即得。
3.2.2供试品溶液的制备 取装量差异项下的内容物适量，研细，精密称取适量(约0.6g)，至50ml量瓶中，加甲醇30ml，超声提取30min，放冷至室温，加甲醇稀释至刻度，摇匀，过滤，精密量取续滤液2ml至10ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
3.3系统适应性试验
取龙胆苦苷对照品溶液，样品溶液和阴性对照溶液，按3.1项下色谱条件进样10μl，结果证明阴性供试样品对龙胆苦苷的含量测定无干扰，龙胆苦苷与其它物质峰均能很好分离，理论塔板数约为6000。
3.4线性范围的考察
精密吸取龙胆苦苷对照品(8.35μg/ml)0.5ml、1.0ml、2.0ml、 3.0ml、4.0ml、5.0ml分别至10ml量瓶中,用甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密量取10μl，按上述色谱条件依次进样测定。以峰面积(Y)对样品浓度(X)进行回归，得标准曲线方程Y=11.91561X-1.01537，r=0.9999。试验结果表明，在4.175～41.75ug/ml浓度范围内，龙胆苦苷的峰面积值与进样浓度有良好线性关系。
3.5线形关系考察
精密吸取线性关系项下的3号溶液10μl，连续进样6次测定峰面积，结果龙胆苦苷面积RSD分别为0.1%(n=6),表明仪器精密度良好。
3.6稳定性试验
精密吸取线性关系项下的3号溶液，分别于0、2、4、6、8、20、48小时进样10μl，测定峰面积，结果龙胆苦苷峰的峰面积RSD为0.47%(n=6)，表明样品供试溶液在48小时内稳定性良好。
3.7重复性试验
取3.2.2项下制成的供试品溶液，共6份 ......
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