补肾壮骨合剂对骨质疏松口腔种植体骨组织界面改建的形态计量学观察
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【摘要】 目的: 通过建立犬骨质疏松模型，研究补肾壮骨合剂对骨质疏松口腔种植体骨组织界面改建的影响。方法:选用动物犬9只，分为中药组、西药组、对照组各3只。将9只犬制作成骨质疏松模型，在三组动物下颌骨分别2颗植入BLB种植体，分不同程期处死动物。采用HE染色对种植体-骨界面改建过程进行动态观察骨质疏松对牙种植体骨结合的影响。结果: 骨计量学测量表明:在种植术后4周及12周时，对照组与西药组比较，结合骨板宽度、种植体骨一结合率及松质骨区骨量均显著降低(P<005或P<0.01)。中药组与对照组比较，除12周时皮质骨接合率及骨矿化率无显著差异外(P>0.05)，其它各项骨计量学参数均显著增高(P<005或<0.01);而与西药组比较，除种植4周时松质区骨量及骨矿化率显著降低外(P<0.01)，其他各项指标均无显著差异(P>0.05)。结论: 补肾壮骨合剂可使骨质疏松犬种植体结合骨板宽度、种植体一骨结合率及松质区骨量明显增加，并提高新生骨组织矿化率，从而促进种植体骨结合。
【关键词】 骨质疏松;种植体;种植体-骨界面;改建
骨质疏松症是以骨量减少，骨小梁稀疏变细为特征的系统性骨代谢疾病，目前被公认为牙种植的相对禁忌症。由于牙种植的患者绝大多数是中老年人，他们也是骨质疏松的高发人群;因而研究骨质疏松对牙种植体骨结合的影响及机理，探索有效途径促进骨质疏松时牙种植体的骨结合，是提高种植体的成功率的关键，对临床上患有骨质疏松的患者行牙种植术具有重要的意义，也是需要解决的重要课题。目前，国内外很多学者应用祖国医学治疗骨质疏松症，但其对骨质疏松时牙种植体骨结合的影响尚不清楚，国内外也未见该方面的实验研究报道。为此，本课题采用双侧卵巢切除法建立犬骨质疏松模型，给予补肾壮骨合剂治疗，并通过制作带种植体的不脱钙骨组织切片，应用计算机图像分析系统，通过骨组织形态计量学方法观察，来进行如下研究: 补肾壮骨合剂对骨质疏松时牙种植体骨结合的影响，探索临床上应用补肾壮骨合剂治疗来促进骨质疏松患者种植体骨结合，提高种植体成功率的可行性，并为此提供科学的实验依据。
1材料与方法
1.1动物模型的建立和组织标本的制备
选用健康雌性犬9只,体质量13~14 kg,年龄为18个月。分为选用动物犬9只，分为中药组(补肾壮骨合剂组)、西药组(雌激素组)、对照组(卵巢切除组)各3只，将9只犬切除双侧卵巢制作成骨质疏松模型，然后拔除双侧下颌第1前磨牙,即刻行BLB种植体植入。中药组每日灌注补肾壮骨合剂，西药组给予肌注苯甲酸雌二醇，20 μg/kg/次，三天一次,对照组肌注生理盐水。种植体植入后3个月,用临床常用方法检测种植体松动度及牙周情况。统一的颗粒状硬质饲料(大连大学动物实验中心提供)定时、定量喂养,自由饮水。每周2次2 g/L洗必泰清洁口腔。分别在加载后4、8、12周各处死1只。采用40 g/L多聚甲醛心内灌注的方式行内固定。取出下颌相应骨段,在种植体外周10 mm处将颌骨截开离断。标本均置于100 g/L EDTA中脱钙3个月。梯度乙醇脱水,石蜡包埋。标本采用颊舌向纵切,厚约4μm,裱于经APES涂布的玻片上。
1.2骨组织形态计量学参数观察:
用IIPIAS一1000型高清晰度彩色图像分析系统对如下骨静态组织学参数进行测量:
1.2.1结合骨板宽度(D):松质骨区种植体一骨界面结合骨板的平均宽度;400倍镜下，每个螺纹至少测量5点取平均值，所有螺纹数据再取平均值为该标本的结合骨板宽度。
1.2.2种植体一骨结合率(C):(种植体与骨板直接接触周长/种植体周长)x100%，又分为皮质骨结合率(CI)及松质骨结合率(CZ);100倍镜下进行测量。
1.2.3松质区骨量(V):松质骨区种植体周围骨小梁面积占相应松质骨区总面积的百分比;100倍镜下在种植体周围1smm范围内进行测量。
1.3统计学处理:上述计量资料用spss11.0统计软件进行统计。
2结果
2.1骨静态组织学参数
种植4周时，对照组(OVX)与西药组(E)比较，结合骨板宽度(D)、种植体一骨结合率(Cl和CZ)及松质区骨量(v)均显著降低(P<0.05或<0.01)。中药组(T)与对照组(OVX)比较，上述各项参数均显著增加(P<0.05或<0.01);而与西药组(E)比较，除松质区骨量(v)差异有显著性外(P<0.01)，种植体一骨结合率(C)及结合骨板宽度(D)差异均无显著性(P>0.05)种植12周时，OVX组与E组比较，结合骨板宽度(D)、种植体一骨结合率(Cl和CZ)及松质区骨量(V)均显著降低(P<0.01)。T组与OVX组比较，除皮质骨结合率(CI)差异无显著性外(P>0.05)，上述各项参数均显著增加(P<0.05或<0.01);而与E组比较，结合骨板宽度(D)、种植体一骨结合率(C)及松质区骨量(V)均无显著性差异(P>0.05)。
2.2骨动态组织学参数:
种植4周时，三组骨矿化率比较，OVX组显著低于E组(P<0.01)。T组则显著高于OVX组(P<0.01)，而显著低于E组(P<0.05)。种植12周时，三组比较差异则无显著性(P>0.05)
3讨论
3.1骨组织形态计量学
组织形态学是研究骨组织的重要手段，能比较直观的反映骨组织的病理变化，但其只能定性描述，难以准确反映量上的改变。骨组织形态计量学(Bonehistomohome)是近些年来发展起来的新技术，其将形态学上的改变加以量化，使结果更具科学性和可比性。本实验应用计算机图像分析系统及多功能网格系统，采用骨组织形态计量学手段，来研究骨质疏松状态下种植体骨结合的变化;研究结果更客观可靠，能准确反映种植体周围骨组织所发生的变化。
3.2补肾壮骨合剂对骨质疏松时口腔种植体骨结合的影响
我们在给骨质疏松犬植入种植体的同时，给予补肾壮骨合剂和雌激素替代治疗;结果表明，在种植4周、12周时，补肾壮骨合剂组与卵巢切除组比较，除种植12周时皮质区种植体一骨结合率外，结合骨板宽度、松质区骨量及种植体一骨结合率均显著增高;说明在骨质疏松状态下，补肾壮骨合剂治疗可使种植体骨结合中结合骨板明显增厚，种植体一骨结合率及松质区骨量增加;从而促进骨质疏松时种植体骨结合。补肾壮骨合剂组与雌激素组比较，除种植4周时松质骨区骨量显著降低外，其它各项指标均无显著性差别;说明对骨质疏松大鼠补充补肾壮骨合剂后，能使各项骨计量参数恢复到与雌激素相似的水平;虽然种植4周时松质骨区骨量仍降低，但种植12周时则明显增加而与雌激素组一致。本实验给予骨质疏松犬补肾壮骨合剂治疗后，种植体周围骨愈合较卵巢切除组明显改善，与补充雌激素有相似的水平，进一步证实补肾壮骨合剂对骨质疏松有显著疗效 ......
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