诏安县生活用水中贾地鞭毛虫及隐孢子虫污染状况调查
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【摘要】目的 了解我市自来水厂的原水、出厂水中贾第鞭毛虫、隐孢子虫的污染现状。方法 于2010年6—12月，用免疫磁分离荧光抗体法对我市n家自来水厂的原水、出厂水进行贾第鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊检测。结果 我市n家自来水厂的原水、出厂水中均未检出贾第鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊。结论 我市供水处理工艺完善，自来水中两虫的去除率符合《生活饮用水卫生标准》要求，未受贾第鞭毛虫和隐孢子虫污染。
【关键词】水质；贾第鞭毛虫；隐孢子虫；污染
贾第鞭毛虫和隐孢子虫是两种常见的饮用水污染致病性原虫，人一旦饮用了受贾第鞭毛虫孢囊和隐孢子虫卵囊污染的水源，就会被二者寄生于肠道内，发生腹泻、呕吐、腹痛、低烧等消化道感染症状，免疫功能正常者一般有自限性，对于免疫功能低下及缺陷者可能会导致死亡。随着国人卫生观念的发展，直接饮用生水的习惯大部分已经得到纠正，但是在我国一些供水质量较差的地区的感染率仍在0.16%-20%之间，在英美等发达国家及我国新疆都曾有暴发人群急性腹泻的流行报道，贾第鞭毛虫和隐孢子虫污染生活用水已成为威胁公众的健康一个重要隐患，我国卫生部门对于预防贾第鞭毛虫和隐孢子虫对生活用水的污染予以高度重视，于2006年发布GB5749—2006《生活饮用水卫生标准》【1】中新增加贾第鞭毛虫和隐孢子虫两个非常规项目，并提出相应的检测方法【2】以加强对贾第鞭毛虫和隐孢子虫污染现状的监测。为了解我市生活用水中贾第鞭毛虫和隐孢子虫原虫孢囊的污染现状，笔者于2010年6—12月对本市6家自来水厂的原水及出厂水进行调查抽检，调查结果现报道如下。
1资料与方法
1.1检测步骤
1.1.1水样富集浓缩随机抽取我市6家自来水厂作为调查对象，对其原水及出厂水分别采集水样20L、100 L。水表接滤囊，以2L/min的水流量采集水样,过滤后的滤囊于4℃避光保存，当天送检。于实验室将滤囊加入淘洗液后置于振荡器上以500次/min的速度重复淘洗5min，将洗脱液合并后以1500 r/min离心(离心半径10cm)15min，剩余沉淀物最后用淘洗液定容至10ml待测。
1.1.2免疫磁分离并免疫荧光染色采用免疫磁分离(IMS)技术将贾第鞭毛虫和隐孢子虫的孢囊或卵囊分离提纯，室温下干燥，于井型玻片上用50μl纯甲醇固定，加50μl单克隆抗体异硫氰酸荧光素稀释液进行染色固定。
1.1.3观察在荧光显微镜下观察贾第鞭毛虫包囊和隐孢子虫卵囊的形态结构并计数阳性虫卵数。形态观察:贾第鞭毛虫包囊椭圆形,长8~12μm,宽7~10μm;隐孢子虫卵囊圆形或卵圆形,直径4~6μm。蓝色荧光(450~480 nm)观察:包囊/卵囊壁发出苹果绿荧光。紫外荧光(330~385 nm)观察: 出现2~4个亮蓝色荧光的包囊/卵囊核。相差干涉DIC观察:包囊/卵囊的内部结构。
1.2检测质控以20 L纯净水为空白对照。取加入3ml 0.05% Tween20的质控标样ColorSeed 1瓶,混匀后加入水样中作为加标样品。将空白对照及加标样品按照按上述检测方法进行过滤、浓缩、分离提纯、染色镜检程序操作。质控要求:空白对照不得检出贾第鞭毛虫包囊和隐孢子虫卵囊,加标样品中贾第鞭毛虫/隐孢子虫回收率≥30%。
2结果
水源水及出厂水贾第鞭毛虫包囊和隐孢子虫卵囊检测结果显示，本次调查的6家自来水厂中有4家水厂的水源水检出贾第鞭毛虫包囊，3家水厂水源水检出隐孢子虫卵囊，出厂水中6家均未检出贾第鞭毛虫包囊和隐孢子虫卵囊。见下表
各自来水厂水源点及出厂水贾地鞭毛虫及隐孢子虫污染检测情况(个·100L-1)
注：1-6代表水厂名称
本检测方法贾地鞭毛虫的回收率为27.8%，标准差10.4，隐孢子虫的回收率为39.3%，标准差8.9.符合美国环保局制定的病原虫检测分析方法中规定的检测结果是否可接受的标准。说明该检测方法符合质量控制要求。
3结论
贾第鞭毛虫和隐孢子虫同是单细胞的寄生虫，能够直接通过饮用水传染而致病。前者以孢囊的形态存在于水中，大小约为8~12μm;后者以卵囊的形式存在于水中,大小为4~6μm，孢贾地鞭毛虫及隐孢子虫的感染期是囊或卵囊期，这个时期的传播力最大，但由于其体积微小，有极强的抗氯性, 故一般过滤方法很难将其捕获清除，常规氯消毒对其效果较差。并且两虫病的传播剂量微小, 贾第鞭毛虫致病剂量为10~100个活孢囊,而隐孢子虫致病剂量仅为1~10个活卵囊，二者在水环境中存活期和潜伏期均较长, 由于其体积小,数量少,普通检测方法不易检出，一旦污染饮用水，将有可能造成大规模的疾病暴发流行.本次调查显示我市6家自来水厂中3家水厂的水源水检出隐孢子虫卵囊，4家水源水检出贾第鞭毛虫包囊，提示上述水厂的水源水已经受到原虫的污染，6家水厂的出厂水均未检出贾第鞭毛虫及隐孢子虫囊，表明在当前的水源水质受到两虫污染的情况下，我市自来水厂的出厂水水质安全仍有保证 ......
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