细菌L型培养基遴选研究
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【摘要】目的：探讨细菌L型培养基的应用效果。方法：利用拉丁方试验方法将四种常见的细菌L型菌落接种到各种培养基中，观察其生长情况，选出最佳培养基。结果：培养基成分最优组合为：10%卵黄盐水、4%NaCl、0.8%琼脂。结论：卵黄盐水作为培养细菌L型的营养成分最佳。
【关键词】细菌L型；培养基；卵黄悬液
细菌L培养基配方已有不少报道，所用营养成分有人血浆、兔血浆、羊血浆、卵黄等，渗透压有3%Nacl、4%Nacl、5%Nacl不等，还有用蔗糖调节渗透压，琼脂浓度有0.7%~1%不同浓度，且不少培养基为某一细菌L型所专用[1-2]。为选择出适于多种细菌L型生长的培养基，我们利用四种常见致病菌与非致病菌包括球菌、杆菌经青霉素诱导为L型后，比较在不同培养基上的生长情况，选出最佳培养基。考虑到报告的各种培养基营养成分差别最大，首先利用拉丁方试验方法对营养成分进行优选试验，在选出最佳营养成分的基础上，进一步进行营养成分、渗透压、琼脂浓度各因素之间交互影响的研究，运用正交试验，选出最佳组合。
1材料
1.1菌种：由山东省防疫站购得金黄色葡萄球菌(金)、甲型链球菌(甲)、伤寒杆菌(伤)、大肠杆菌(大)各5株。经青霉素诱导为L型[3-4]，菌落及细胞壁染色均典型后用于下一步试验。
1.2营养成分：人血浆购自德州血站，羊血浆、兔血浆由本实验室饲养动物直接采取，鸡蛋购自鸡场三日内鲜蛋。
1.3方法
1.3.1运用拉丁方设计实验如下
菌株： A(金)B(大)C(伤) D(甲)
成分： 羊血浆人血浆 卵黄盐水兔血浆
浓度：5%10% 15%20%
按水平数选4×4 基本方，使用整行整列调换使之随机化，并规定字母为菌株，行为浓度，列为营养成分。
选基本方：
将四种细菌L型之典型菌落接种高渗肉汤培养6小时后，取0.1ml，涂布接种于各种培养基，放37℃大气环境48小时，观察记录其L型菌落形成单位。每种培养基种5个平皿，计数菌落数后取平均值。
1.3.2运用正交法设计实验如下
每种培养基种20个平皿，每种每株一个平皿，细菌接种方法及结果记录同前。
2结果
2.1拉丁方试验结果以菌落形成单位表示。
统计学处理结果：
V1=3V2=12查F界值表P<0.01各处理间有明显差异。
处理间样本均数两两比较(q检验)
2.2正交试验结果选正交表如下：Le(3)4结果以菌落形成单位表示。
极差分析：
I429 446 440I+II+III=1481
II 650 605 525主要因素为A
III402 442 516最优组合：
R 248 16385AII BII CII
3讨论
研究结果表明，卵黄盐水和人血浆是培养细菌L型的最佳营养成分，两者之间无明显差异。卵黄营养丰富，且不含抗体、补体、干扰素、淋巴因子等不利于细菌生长的免疫活性成分；加之卵黄材料易得，价格便宜，易于保存，不易污染，不需灭活等优点，因此，卵黄盐水作为培养细菌L型的营养成分，可推广应用。
经统计学处理表明，其最优组合为：10%卵黄盐水、4%NaCl、0.8%琼脂。
参考文献
[1] 郭玉华.血液标本L型细菌培养 ......
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