cyclinB1和Survivin在卵巢肿瘤组织的表达及作用研究
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【摘要】 目的：探讨cyclinB1和Survivin在卵巢上皮性肿瘤的表达与肿瘤良恶性、肿瘤分级的关系，来评判肿瘤的恶性程度及更好地预测患者的生存率。 方法：采用免疫组化法检测58例上皮性卵巢癌、62例上皮性卵巢良性肿瘤中cyclinB1和Survivin的表达情况，分析cyclinB1和Survivin的表达与临床病理特征的关系。 结果：cyclinB1和Survivin在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率明显高于卵巢良性上皮性肿瘤，并且随着临床分期越晚及病理学分级越高，cyclinB1和Survivin的阳性表达也越明显。(P<0.05) 结论：cyclinB1和Survivin在上皮性卵巢癌组织中的异常表达与上皮性卵巢癌的恶性程度有关。
【关键词】 上皮性卵巢癌；cyclinB1；Survivin；免疫组织化学
近年来，卵巢癌发病率呈逐渐上升趋势，且发生浸润或转移者预后较差，其发病机制也不完全明了。由于卵巢癌的发生、浸润及转移是一个十分复杂的多种共刺激分子协同作用的生物学现象，因此，研究卵巢癌细胞的恶性生物学相关机制，对探索卵巢癌的发生，控制肿瘤的增殖具有深远的理论意义和现实应用价值。
1 材料与方法
1.1 组织标本
所有组织标本均选自我院2006年5月~2010年4月存档且有完整随访资料的卵巢肿瘤标本120例，其中卵巢恶性肿瘤58例，卵巢良性肿瘤62例，平均年龄36.2岁(22-63岁)，患者术前均未接受放疗、化疗及性激素治疗。1.2 试剂与方法
所有组织标本均用磷酸缓冲液配置的4%中性甲醛固定液及时固定后，接着进行乙醇梯度脱水、二甲苯透明以及石蜡包埋，4um厚度连续切片5张，一张行HE染色，余行免疫组织化学SP研究。
1.3 免疫组织化学实验
鼠抗人CerbB-2及兔抗人P53多克隆抗体均购自武汉博十德生物工程公司，SP超敏试剂盒购自福建迈新生物技术有限公司。按试剂盒说明书步骤进行染色，用磷酸盐缓冲液(PBS)代替一抗作为阴性对照，已知阳性标本作为阳性对照。
实验结果判定：以细胞浆内或细胞膜出现棕黄色颗粒为阳性表达。表达强度以阳性细胞的百分率来判断。判断标准为随机选择5个高倍视野(×400)计算肿瘤细胞个数和阳性细胞个数：细胞完全不着色为阴性(-)；肿瘤细胞染色在10%-30%为弱阳性(+)；细胞染色在30%-60% 为阳性(++)；肿瘤细胞染色>60%为强阳性(+++)。
1. 4 统计学处理
采用SPSS13.0软件包进行统计学处理分析，用X2检验。
2 结果
2.1 cyclinB1和Survivin在卵巢上皮性肿瘤的表达
免疫组化结果表明，cyclinB1和Survivin在上皮性卵巢癌组织中的阳性表达率明显高于卵巢良性上皮性肿瘤(P<0.05)(表1)
2.2 cyclinB1和Survivin与卵巢癌临床分期及病理分级的关系
不同病理学类型的卵巢癌组织中cyclinB1和Survivin 阳性表达率相比较，无统计学意义(P>0.05)，而在临床分期上，cyclinB1和Survivin在不同期别的卵巢癌组织中的阳性表达之间存在着差异性(P<0.05)，分期越晚，其阳性表达率越高；组织学分级也有差异性(P<0.05)。组织学分级越高，cyclinB1和Survivin的阳性表达率越高[1]。
3 讨论
Survivin基因是近年来发现的凋亡蛋白抑制因子家族中的一个新成员，多种肿瘤中存在该基因的异常表达。它主要通过直接抑制caspase-3和caspase-7的活性而阻断细胞凋亡过程。Survivin蛋白参与细胞增殖、细胞周期及细胞凋亡的调控，其过度表达可能直接促进细胞逃离生长监控，造成细胞增殖增加、凋亡减少，导致肿瘤发生。在细胞发生恶性转化过程中，除了癌基因/抑制基因的正负调节失控外，细胞周期调控因子也参与癌变过程的调节，如细胞周期蛋白(cyclin)。cyclinB1是细胞周期G2/M限制点的主要调控元件之一，cyclinB1的过表达可能是G2/M过度的促进因素[2]。cyclinB1和Survivin在卵巢癌组织中的过度表达不仅与卵巢癌的发生、发展、侵袭和转移密切相关，而且与化疗耐药，对激素治疗不敏感和预后不良也密切相关。
本研究结果显示，在卵巢癌中cyclinB1和Survivin蛋白的阳性表达率较高，明显高于对照组，差异有显著性，而且随着肿瘤组织学分级增加，cyclinB1和Survivin蛋白的阳性表达率也逐渐增加，差异有显著性，提示cyclinB1和Survivin蛋白在肿瘤形成的早期阶段和中晚期进展阶段都发挥着作用，与国内外学者研究结果一致 ......
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