补阳还五汤中总黄酮的提取工艺研究(2)
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乙醇浓度为70%,60min /次,溶剂量为150ml来提取,提取次数分别为1 次, 2 次, 3次, 4 次。再测定各水平总黄酮的吸光度为0.123，0.145，0.150，0.143，得提取3次最好。
2.3.2验证性实验
取补阳还伍汤药材按最佳工艺条件进行提取，进行验证实验结果见表。
3讨论
试验结果亦表明总黄酮的提取工艺与乙醇浓度及溶剂倍量有显著关系，所以最终确定补阳还五汤中总黄酮的提取工艺条件为A2B1C3D2，确定补阳还五汤中总黄酮的最佳工艺条件为用70%的乙醇150ml煎煮3次，每次90min。且试验证明其精密度和稳定性良好。用铝盐分光光度法测定黄酮的含量,结果准确可靠,操作简单易行，此法的关键是显色时间要把握好，一般以11min为宜。所得总黄酮是深棕色物质，为方便以后的含量测定，用60%的乙醇定容。初步测得补阳还五汤中总黄酮的含量为41.402mg/ml。提取时间的长短和恒温水浴温度的控制，实质上是体现在温度对浸提效果的影响，一方面浸提速度直接与浸提温度成正相关，另一方面温度升高，溶剂的粘度减少，也增大了浸提温度效率。但是，鉴于有效成分的热稳定性，以及温度升高时杂质溶出量也相应增大，在提取时浸提温度不能过高，同时也考虑到乙醇的沸点是78.5℃，温度过高，乙醇挥发严重，生产成本增大。因此将恒温水浴锅温度控制在80℃-85℃之间。本试验以廉价、安全的乙醇作为提取溶剂，所得样品有效成分含量高，表明该方法简便、实用、经济。为补阳还五汤的进一步研究和开发提供资料和依据，为补阳还五汤及其它经典复方的创新研究提供一定的参考价值。
参考文献
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基金项目：浙江省大学生科技创新项目(2010R410032)浙江省教育厅2010高校博士研究生创新项目
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