解毒抗白颗粒的鉴别与检查研究
【摘要】目的：对解毒抗白颗粒的鉴别与检查方法进行研究。方法：采用TLC法对解毒抗白颗粒中白花蛇舌草、夏枯草、半枝莲、浙贝母、龙葵和黄芪等药材进行了鉴别试验，并进行了制剂通则检查。结果：薄层色谱鉴别的药材在相应的位置上显相同颜色的斑点，阴性对照无干扰；制剂检查结果符合要求。结论：所建立的鉴别方法简便、灵敏、重复性较好，为该制剂的质量控制提供了实验依据。
【关键词】 解毒抗白颗粒；薄层色谱鉴别；制剂通则检查
解毒抗白颗粒由壮医药临床经验方研制而成，具有清热解毒、化瘀散结、益气生血的功能。用于治疗急性白血病、慢性白血病各期，单用或配伍化疗药物。该制剂主要由白花蛇舌草、半枝莲、夏枯草、莪术、甘草等中药和壮药组成。白花蛇舌草清热解毒，主要成分为齐墩果酸[1]；半枝莲具有清热解毒、化瘀利尿[2] 的功效 ，其主要成分为野黄芩苷；夏枯草清火、散结、消肿，主要成分为熊果酸[2]。本文对该制剂中白花蛇舌草、夏枯草、半枝莲、浙贝母、龙葵和黄芪等药材进行了薄层色谱鉴别研究，并作了制剂通则检查，为该制剂的质量控制提供了实验依据，可保证该制剂的质量可控。
, 百拇医药
1仪器与试药
1.1仪器939型薄层自动铺板器(重庆南岸贝尔德仪器)，Linomat5半自动点样仪。
1.2试药齐墩果酸对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、三七皂苷R1对照品、贝母素甲对照品、贝母素乙对照品、野黄芩苷对照品、黄芪甲苷对照品、白花蛇舌草对照药材、夏枯草对照药材、浙贝母对照药材、半枝莲对照药材、三七对照药材、红参对照药材和黄芪对照药材(均由中国药品生物制品检定所提供)。龙葵对照药材由南宁元桂中药饮片有限责任公司提供并经鉴定。硅胶G(60型，青岛海洋化工集团公司)，实验所用试剂均为分析纯。
1.3实验样品解毒抗白颗粒由我院中药制剂工程中心制备提供。
2薄层色谱鉴别
2.1白花蛇舌草和夏枯草的鉴别
, 百拇医药
取本品约1g，研细，加乙醇20mL回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚(60℃-90℃)浸泡2次，每次15mL，2min后倾去石油醚液，残渣加乙醇1mL溶解作为供试品溶液。另取齐墩果酸对照品适量，加乙醇制成每1mL含1mg 的溶液作为对照品溶液。再取白花蛇舌草和夏枯草对照药材各0.5g，按供试品溶液制法制得对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述吸取上述五种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10:2.5:4:0.25)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液。105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
2.2三七和红参的鉴别
取本品约2g，研细，加乙醚20mL加热回流30min，放冷，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干后加甲醇20mL回流30min, 放冷至室温，滤过，滤液蒸干，残渣加水10mL溶解，用水饱和正丁醇提取 3 次(15 mL，10 mL，5 mL)，合并正丁醇液, 用氨试液洗涤4次(20 mL，20 mL，15 mL，10 mL)，再用正丁醇饱和水洗涤2次(15 mL，10mL)，弃去洗涤液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1、Rb1、Re，三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1mL含人参皂苷Rg1 0.70mg，人参皂苷Rb1 0.50mg，人参皂苷Re 0.70mg，三七皂苷R1 0.50mg的混合溶液作为对照品溶液。再取三七和红参对照药材各1g，同法制得对照药材溶液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
, 百拇医药
2.3半枝莲的鉴别
取本品约2g，研细，加乙醚30mL加热回流30min，弃去乙醚液，残渣加甲醇30mL使溶解，加热回流30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解作为供试品溶液。另取野黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液作为对照品溶液。再取半枝莲对照药材1g，同法制得对照药材溶液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
2.4浙贝母的鉴别
取本品约10g，研细，加甲醇30mL，加热回流1h，滤过，滤液蒸干，残渣加0.1mol/L 盐酸20mL溶解，滤过，滤液加浓氨试液调pH值至9～10，用氯仿提取两次(30mL,30mL)，合并氯仿液，蒸干，残渣加氯仿0.5mL溶解作为供试品溶液。另取贝母素甲、贝母素乙对照品适量，加甲醇制成浓度为每1mL各含2mg的混合溶液作为对照品溶液。再取浙贝母对照药材1g，同法制得对照药材溶液。按处方比例取缺浙贝母以外的药材，按制法项下规定制成缺浙贝母的阴性样品，按供试品溶液制法制成缺浙贝母阴性对照溶液。吸取上述四种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-浓氨水(17:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾溶液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的橙红色斑点，阴性对照无干扰。
, 百拇医药
2.5龙葵的鉴别
取本品约5g，研细，加水30mL煮沸1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加70%乙醇20mL溶解，在5-10℃下放置2h，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL 使溶解，用氯仿振摇萃取3次(15mL，15 mL，15 mL)，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1mL溶解作为供试品溶液。另取龙葵对照药材1g，同法制得对照药材溶液。按处方比例取缺龙葵以外的药材，按制法项下的规定制成缺龙葵的阴性样品，按供试品溶液制法制成缺龙葵阴性对照溶液。吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-氯仿-正己烷-氨水(13:2:0.6:0.25)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
2.6黄芪的鉴别
取本品约3g，研细，加甲醇20mL回流1h，滤过，滤液过中性氧化铝柱(氧化铝7g)，用40%甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30mL溶解，用水饱和正丁醇萃取2次，每次20mL，合并正丁醇液，再用水洗涤2次，每次20mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成浓度为每1mL含1mg的溶液作为对照品溶液。再取黄芪照药材3g，同法制得对照药材溶液。按处方比例取缺黄芪以外的药材，按制法项下规定制成缺黄芪的阴性样品，按供试品溶液制法制成缺黄芪阴性对照溶液。吸取上述四种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，置以氯仿-甲醇-水(12:9:4)为展开剂的展开缸中饱和15min，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
3制剂通则检查
3.1性状
本品为颗粒剂，棕黄色颗粒，味苦。
3.2粒度检查, 百拇医药(陈勇 钟鸣 李耀华 蔡乐 巫繁菁 黄颖)
【关键词】 解毒抗白颗粒；薄层色谱鉴别；制剂通则检查
解毒抗白颗粒由壮医药临床经验方研制而成，具有清热解毒、化瘀散结、益气生血的功能。用于治疗急性白血病、慢性白血病各期，单用或配伍化疗药物。该制剂主要由白花蛇舌草、半枝莲、夏枯草、莪术、甘草等中药和壮药组成。白花蛇舌草清热解毒，主要成分为齐墩果酸[1]；半枝莲具有清热解毒、化瘀利尿[2] 的功效 ，其主要成分为野黄芩苷；夏枯草清火、散结、消肿，主要成分为熊果酸[2]。本文对该制剂中白花蛇舌草、夏枯草、半枝莲、浙贝母、龙葵和黄芪等药材进行了薄层色谱鉴别研究，并作了制剂通则检查，为该制剂的质量控制提供了实验依据，可保证该制剂的质量可控。
, 百拇医药
1仪器与试药
1.1仪器939型薄层自动铺板器(重庆南岸贝尔德仪器)，Linomat5半自动点样仪。
1.2试药齐墩果酸对照品、人参皂苷Rg1对照品、人参皂苷Rb1对照品、人参皂苷Re对照品、三七皂苷R1对照品、贝母素甲对照品、贝母素乙对照品、野黄芩苷对照品、黄芪甲苷对照品、白花蛇舌草对照药材、夏枯草对照药材、浙贝母对照药材、半枝莲对照药材、三七对照药材、红参对照药材和黄芪对照药材(均由中国药品生物制品检定所提供)。龙葵对照药材由南宁元桂中药饮片有限责任公司提供并经鉴定。硅胶G(60型，青岛海洋化工集团公司)，实验所用试剂均为分析纯。
1.3实验样品解毒抗白颗粒由我院中药制剂工程中心制备提供。
2薄层色谱鉴别
2.1白花蛇舌草和夏枯草的鉴别
, 百拇医药
取本品约1g，研细，加乙醇20mL回流1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加石油醚(60℃-90℃)浸泡2次，每次15mL，2min后倾去石油醚液，残渣加乙醇1mL溶解作为供试品溶液。另取齐墩果酸对照品适量，加乙醇制成每1mL含1mg 的溶液作为对照品溶液。再取白花蛇舌草和夏枯草对照药材各0.5g，按供试品溶液制法制得对照药材溶液。照薄层色谱法(中国药典一部附录Ⅵ B)试验，吸取上述吸取上述五种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸(10:2.5:4:0.25)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液。105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
2.2三七和红参的鉴别
取本品约2g，研细，加乙醚20mL加热回流30min，放冷，滤过，弃去乙醚液，药渣挥干后加甲醇20mL回流30min, 放冷至室温，滤过，滤液蒸干，残渣加水10mL溶解，用水饱和正丁醇提取 3 次(15 mL，10 mL，5 mL)，合并正丁醇液, 用氨试液洗涤4次(20 mL，20 mL，15 mL，10 mL)，再用正丁醇饱和水洗涤2次(15 mL，10mL)，弃去洗涤液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1 mL使溶解作为供试品溶液。另取人参皂苷Rg1、Rb1、Re，三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1mL含人参皂苷Rg1 0.70mg，人参皂苷Rb1 0.50mg，人参皂苷Re 0.70mg，三七皂苷R1 0.50mg的混合溶液作为对照品溶液。再取三七和红参对照药材各1g，同法制得对照药材溶液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
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2.3半枝莲的鉴别
取本品约2g，研细，加乙醚30mL加热回流30min，弃去乙醚液，残渣加甲醇30mL使溶解，加热回流30min，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1mL溶解作为供试品溶液。另取野黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1mL含1mg的溶液作为对照品溶液。再取半枝莲对照药材1g，同法制得对照药材溶液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
2.4浙贝母的鉴别
取本品约10g，研细，加甲醇30mL，加热回流1h，滤过，滤液蒸干，残渣加0.1mol/L 盐酸20mL溶解，滤过，滤液加浓氨试液调pH值至9～10，用氯仿提取两次(30mL,30mL)，合并氯仿液，蒸干，残渣加氯仿0.5mL溶解作为供试品溶液。另取贝母素甲、贝母素乙对照品适量，加甲醇制成浓度为每1mL各含2mg的混合溶液作为对照品溶液。再取浙贝母对照药材1g，同法制得对照药材溶液。按处方比例取缺浙贝母以外的药材，按制法项下规定制成缺浙贝母的阴性样品，按供试品溶液制法制成缺浙贝母阴性对照溶液。吸取上述四种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-甲醇-浓氨水(17:2:1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以改良碘化铋钾溶液。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的橙红色斑点，阴性对照无干扰。
, 百拇医药
2.5龙葵的鉴别
取本品约5g，研细，加水30mL煮沸1h，放冷，滤过，滤液蒸干，残渣加70%乙醇20mL溶解，在5-10℃下放置2h，滤过，滤液蒸干，残渣加水20mL 使溶解，用氯仿振摇萃取3次(15mL，15 mL，15 mL)，合并氯仿液，蒸干，残渣加甲醇1mL溶解作为供试品溶液。另取龙葵对照药材1g，同法制得对照药材溶液。按处方比例取缺龙葵以外的药材，按制法项下的规定制成缺龙葵的阴性样品，按供试品溶液制法制成缺龙葵阴性对照溶液。吸取上述三种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以乙酸乙酯-氯仿-正己烷-氨水(13:2:0.6:0.25)为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
2.6黄芪的鉴别
取本品约3g，研细，加甲醇20mL回流1h，滤过，滤液过中性氧化铝柱(氧化铝7g)，用40%甲醇洗脱，收集洗脱液，蒸干，残渣加水30mL溶解，用水饱和正丁醇萃取2次，每次20mL，合并正丁醇液，再用水洗涤2次，每次20mL，弃去水液，正丁醇液蒸干，残渣加甲醇1mL使溶解作为供试品溶液。另取黄芪甲苷对照品适量，加甲醇制成浓度为每1mL含1mg的溶液作为对照品溶液。再取黄芪照药材3g，同法制得对照药材溶液。按处方比例取缺黄芪以外的药材，按制法项下规定制成缺黄芪的阴性样品，按供试品溶液制法制成缺黄芪阴性对照溶液。吸取上述四种溶液各10μL，分别点于同一硅胶G薄层板上，置以氯仿-甲醇-水(12:9:4)为展开剂的展开缸中饱和15min，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑点显色清晰，置紫外光灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照药材和对照品相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点，阴性对照无干扰。
3制剂通则检查
3.1性状
本品为颗粒剂，棕黄色颗粒，味苦。
3.2粒度检查, 百拇医药(陈勇 钟鸣 李耀华 蔡乐 巫繁菁 黄颖)