定风止痛片中乌头碱的限量检查及三味药材的薄层鉴别
 |
| 第1页 |
参见附件(2327KB，2页)。
【摘要】 目的：建立定风止痛片中乌头碱的控制方法及三七、防风、羌活的鉴别方法。方法：采用TLC法对处方中三七、防风、羌活进行鉴别；采用TLC法对制白附子中乌头碱进行限量检查。结果：本实验中建立的薄层色谱鉴别方法专属性强、斑点清晰、重现性好；乌头碱检查方法方便、准确、重现性好。结论：本文所建立的方法可有效控制本品质量。
【关键词】 定风止痛片；限量检查；薄层鉴别
“定风止痛片”系由“定风止痛胶囊”经改变剂型制成的片剂。“定风止痛胶囊”收载于《部颁标准》(中药成方制剂)20册中，由三七、防风、天麻、白附子(制)、羌活等8味药组成，产品具有祛风化痰，行瘀散结，消肿定痛的功效，用于风痰瘀血阻络引起的关节肿胀疼痛、筋脉拘挛、屈伸不利，及破伤风的辅助治疗。【1】产品临床疗效确切，深受患者好评。但胶囊剂处方药材均为生药粉直接入药，且质量标准较低，标准中只有粉末的显微鉴别，和三七的薄层鉴别。在此，我们本着中药现代化和积极相应国家关于有价值中药品种二次开发的原则，对本品进行了进一步开发，首先，在工艺上，我们将全部生药粉入药工艺改成了提取工艺，其次，为了更好地控制产品质量，我们重新制定了一套较严格的质量标准，标准的部分内容即采用TLC法对三七、防风、羌活进行鉴别；采用TLC法对制白附子中乌头碱进行限量检查。以此为患者用药的安全性、有效性提供更好的保障。
1仪器与试药
电子天平(Marx200g，d=0.0001g)；硅胶G薄层板(青岛海洋化工厂)。
甲醇(色谱醇)、去离子水、其余试剂均为分析醇。
三七对照药材、羌活对照药材、升麻苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷、乌头碱对照品(均由中国药品生物制品检定所提供)；定风止痛片(我公司自制)。
2薄层色谱定性鉴别
2.1三七的鉴别 取本品10片，研细，称取细粉约2g，置具塞三角瓶中，加15ml水饱和正丁醇超声处理10分钟，滤过，滤液用20ml氨试液洗涤一次，分取正丁醇层，减压回收正丁醇至干，残渣加1ml甲醇溶解，作为供试品溶液。另取三七对照药材0.15g，置具塞三角瓶中，加20ml甲醇超声提取30分钟，滤过，蒸干甲醇，残渣用15ml水饱和正丁醇溶解，并超声处理10分钟，同供试液的制备方法制成对照药材溶液。另取三七阴性样品按供试液的制备方法制成阴性对照液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部，附录ⅥB)试验，吸取供试品溶液、对照药材溶液、及阴性液各5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-醋酸乙酯-甲醇-水(8：18：10：5)的下层溶液为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，于105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，阴性样品无干扰。
2.2防风的鉴别 取含量测定项下的供试液2ml，水浴浓缩至约0.2ml，作为供试品溶液。取升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照品，加乙醇分别制成1mg/ml的溶液，作为防风的对照品溶液。另取防风阴性样品，同供试液的制备方法制成阴性对照液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部，附录ⅥB)试验，吸取供试液及阴性液各8ul、升麻苷对照液和5-O-甲基维斯阿米醇苷对照液各2ul，分别点于同一硅胶GF254薄层板上，以氯仿-甲醇(4：1)为展开剂，展开，取出，晾干，至紫外灯(254nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光淬灭斑点，阴性样品无干扰。
2.3羌活的鉴别 取本品10片，研细，称取细粉约3g，置具塞三角瓶中，加20ml甲醇超声处理10分钟，滤过，滤液置水浴上浓缩至约1ml，作为供试品溶液。另取羌活对照药材1g，同供试品溶液的方法操作，制成羌活的对照药材溶液。另取羌活阴性样品，同供试品溶液的方法操作，制成羌活的阴性对照液。照薄层色谱法(《中国药典》2005年版一部，附录ⅥB)试验，吸取供试液及阴性液各10ul、羌活对照液2ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以氯仿-甲醇(8：1)为展开剂，展开，取出，晾干，至紫外灯(365nm)下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的亮蓝色荧光斑点，阴性样品无干扰。
图1三七图2 羌活 图3 防风
注：图1、图2 (1、对照药材2、阴性 3、4、5 三批样品)
图3(1、5-O-甲基维斯阿米醇苷2、升麻苷 3、阴性 4、5、6 三批样品)
3乌头碱限量检查
取本品15片，研细，称取细粉4g，置具塞锥形瓶中，加氨试液1ml，拌匀，放置2h，加乙醚60ml，搅拌，置水浴恒温振荡器中，振荡1h，放置24h，滤过，滤液蒸干，残渣加无水乙醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取乌头碱对照品，加无水乙醇制成每1ml含1 mg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法(附录ⅥB)试验，吸取供试品溶液4ul，对照品溶液5ul，分别点于同一硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(1：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以碘化钾碘试液与碘化铋钾试液的等容混合液。供试品色谱中，在与对照品色谱相应位置上出现的斑点应小于对照品的斑点或不出现斑点。(结果见图4)
图4 乌头碱限量检查
(1、5 乌头碱对照品2、3、4 三批样品 ) ......
您现在查看是摘要介绍页，详见PDF附件(2327KB，2页)。